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詳述分光光度計(jì)的具體分類及應(yīng)用
詳述分光光度計(jì)的具體分類及應(yīng)用
分光光度計(jì),，又稱光譜儀，是將成分復(fù)雜的光,，分解為光譜線的科學(xué)儀器,。測(cè)量范圍一般包括波長(zhǎng)范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200～380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源,。鎢燈的發(fā)射光譜：鎢燈光源所發(fā)出的380～780nm波長(zhǎng)的光譜光通過三棱鏡折射后,，可得到由紅、橙,、黃,、綠、藍(lán),、靛,、紫組成的連續(xù)色譜,；該色譜可作為可見光分光光度計(jì)的光源。
分光光度計(jì)是一種分析測(cè)量光譜的儀器,，因?yàn)閼?yīng)用需求的不同,，分光光度計(jì)有著不同的種類。分光光度計(jì)按照波長(zhǎng)及應(yīng)用領(lǐng)域的不同可以分為：
(1)可見光分光光度計(jì)
(2)紫外分光光度計(jì)
(3)紅外分光光度計(jì)
(4)熒光分光光度計(jì)
(5)原子吸收分光光度計(jì),。
現(xiàn)今生命科學(xué)領(lǐng)域比較流行的*微量分光光度計(jì)是屬于紫外分光光度計(jì)的一種,。
(1)可見分光光度計(jì)
用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見光(400～760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器，稱為可見分光光度計(jì),?？稍?00nm測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。
(2)紫外可見分光光度計(jì)
紫外可見分光光度計(jì)用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見光或紫外光(200～760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,?？梢詼y(cè)定核酸和蛋白的濃度，也可以測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度,。紫外分光光度計(jì)又可分為單光束,假雙光束,雙光束,。它們的用途又有區(qū)別。
a) 單光束：適于在給定波長(zhǎng)處測(cè)量吸光度或透光度,，一般不能作全波段光譜掃描,，要求光源和檢測(cè)器具有很高的穩(wěn)定性。
b) 雙光束：自動(dòng)記錄,，快速全波段掃描,。可消除光源不穩(wěn)定,、檢測(cè)器靈敏度變化等因素的影響,，特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜,，價(jià)格較高,。
c) 假雙光束也就是比例雙光束，它的原理是由同一單色器發(fā)出的光被分成兩束,，一束直接到達(dá)檢測(cè)器,，另一束通過樣品后到達(dá)另一個(gè)檢測(cè)器。這種儀器的優(yōu)點(diǎn)是可以監(jiān)測(cè)光源變化帶來(lái)的誤差,，但是并不能消除參比造成的影響,。
(3)紅外分光光度計(jì)
一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜，這是研究有機(jī)化合物較為常用的光譜區(qū)域,，能分析各種狀態(tài)(氣,、液、固)的試樣。
紅外光譜法的特點(diǎn)是：快速,、樣品量少(幾微克-幾毫克),，特征性強(qiáng)(各種物質(zhì)有其特定的紅外光譜圖)、能分析各種狀態(tài)(氣,、液,、固)的試樣以及不破壞樣品。
(4)熒光分光光度計(jì)
熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器,。應(yīng)用于科研,、化工、醫(yī)藥,、生化,、環(huán)保以及臨床檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域,。
通過對(duì)這些參數(shù)的測(cè)定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。
(5)原子吸收分光光度計(jì)
主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規(guī)儀器之一,。是材料分析及質(zhì)量控制部門進(jìn)行常量,、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。
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