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豬促卵泡素,豬促卵泡素ELISA試劑盒
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  • 豬促卵泡素,豬促卵泡素ELISA試劑盒

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貨物所在地: 上海上海市
產(chǎn)地: 進口
更新時間: 2025-01-25 21:00:07
期: 2025年1月25日--2025年7月25日
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產(chǎn)品簡介

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詳細介紹

 

豬促卵泡素,,豬促卵泡素ELISA試劑盒

 

 

試劑盒內(nèi)容及其配制

試劑盒成份
96孔配置
48孔配置
96/48人份酶標板
1塊板(96T)
半塊板(48T)
塑料膜板蓋
1塊
半塊
標準品:20ng/ml    
1瓶(1.0ml)
1瓶(0.5ml)
空白對照
1瓶(1.0ml)
1瓶(0.5ml)
標準品稀釋緩沖液
1瓶(8.0ml)
1瓶(4.0ml)
生物素標記的抗OTR抗體
1瓶(8.0ml)
1瓶(4.0ml)
親和鏈酶素-HRP
1瓶(12ml)
1瓶(5ml)
洗滌緩沖液
1瓶(20ml)
1瓶(10ml)
底物A
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
底物B
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
終止液
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)

 
自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul,、10ul,、50ul、100ul,、200ul,、500ul、1000ul,。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等,。
4.
 
樣品收集、處理及保存方法
 
1,、血清……操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原
和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血紅
 
細胞迅速小心地分離,。
2、 血漿……EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3,、 細胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4,、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,取上清液,。
 5,、 保存……如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,,避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
 
操作注意事項
 
●   試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
●   實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
●   不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
●   使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器。
●   使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
●   底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
●   加入試劑的順序應(yīng)*,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
●   按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。
 
 
 
 
安全性
 
1.   避免直接接觸終止液和底物A,、B,一旦接觸到這些液體,,請盡快用水沖洗,。
2.   實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品,。
3.   不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
 
試劑的準備
 
1.   標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存,。稀釋前將標準品振蕩混勻,。稀釋比例按下表中進行:

20
ng/ml
(6號標準品)
原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
10
ng/ml
(5號標準品)
100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
5
ng/ml
(4號標準品)
100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
2.5
ng/ml
(3號標準品)
100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
1.25
ng/ml
(2號標準品)
100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
0.6
ng/ml
(1號標準品)
100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
0
ng/ml
(空白對照)
原倍濃度不用稀釋直接加入50ul

 
 
2.   洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
 
試劑盒性能:
 
1.   靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品,。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2.   特異性:不與其它細胞因子反應(yīng),。
3.   重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%,。
 
操作步驟
 
1.   使用前,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2.   根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。
3.   加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育45分鐘,。
4.   甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作4次,。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
5.   每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
6.   甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次,。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
7.   每孔加入底物A,、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照,。
8.   取出酶標板,,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
9.   在450nm波長處測定各孔的OD值,。
 
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
 
1、 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2,、 以吸光度OD值為縱坐標(Y),,相應(yīng)的OTR標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,,樣品的OTR含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度,,再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實際濃度。
3,、 檢測值范圍: 0-20ng/ml
4,、 敏感度:0.1ng/ml

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