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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
上海恒遠(yuǎn)生物“兔核因子κB亞基p65親和肽，兔核因子κB亞基p65親和肽ELISA試劑盒"保證質(zhì)量,，價(jià)格合理,科研專(zhuān)用,凡在本司購(gòu)買(mǎi)此試劑盒的客戶(hù),均可享受免費(fèi)代測(cè)服務(wù),，歡迎您。
詳細(xì)介紹
兔核因子κB亞基p65親和肽 檢測(cè)試劑盒 elisa實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品名稱(chēng)：兔核因子κB亞基p65親和肽,，兔核因子κB亞基p65親和肽ELISA試劑盒
英文名稱(chēng)：Rabbit nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA KIT
試劑盒操作步驟
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,，請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),，均需混勻,，混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),。如樣品濃度過(guò)高時(shí),，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)允箻悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍。加樣時(shí),，槍頭應(yīng)直接對(duì)準(zhǔn)液面,，切勿沿孔壁加樣。
加樣：分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡,，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻,，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,，37℃反應(yīng)120分鐘,。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
棄去液體,，甩干，不用洗滌,。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl（取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制）,，37℃,60分鐘,。
溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體,，甩干,，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘,，200μl/每孔,，甩干。
每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同生物素標(biāo)記抗體工作液）100μl,，37℃,，60分鐘。
溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘,，200μl/每孔，甩干,。
依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi),，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,，后3-4孔顯色不明顯，即可終止）,。
依序每孔加終止溶液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）,。在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行檢測(cè),。
兔核因子κB亞基p65親和肽 檢測(cè)試劑盒 elisa實(shí)驗(yàn)