詳細介紹
兔血清淀粉樣蛋白A 檢測試劑盒 elisa實驗
產(chǎn)品名稱:兔血清淀粉樣蛋白,兔血清淀粉樣蛋白A ELISA試劑盒
英文名稱:Rabbit Serum amyloid A,SAA ELISA KIT
試劑盒操作步驟
實驗開始前,,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,,混勻時盡量避免起泡,。每次檢測都應(yīng)該做標準曲線。如樣品濃度過高時,,用樣品稀釋液進行稀釋,,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。加樣時,,槍頭應(yīng)直接對準液面,,切勿沿孔壁加樣。
加樣:分別設(shè)空白孔,、標準孔,、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,,加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,,酶標板加上蓋或覆膜,,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,,每次實驗請使用新的標準品溶液,。
棄去液體,甩干,,不用洗滌,。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),,37℃,60分鐘,。
溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,,200μl/每孔,,甩干。
每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液)100μl,,37℃,,60分鐘。
溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,洗板5次,,每次浸泡1-2分鐘,,200μl/每孔,甩干,。
依序每孔加底物溶液90μl,,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,,后3-4孔顯色不明顯,,即可終止),。
依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結(jié)果的準確性,,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值),。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測,。
兔血清淀粉樣蛋白A 檢測試劑盒 elisa實驗