詳細介紹
兔子細胞間粘附分子2 elisa原理 elisa法
產(chǎn)品名稱:兔子細胞間粘附分子2 ELISA試劑盒
英文名稱:rabbit intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA KIT
試劑盒操作步驟
實驗開始前,,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,,均需混勻,,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線,。如樣品濃度過高時,,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍,。加樣時,,槍頭應直接對準液面,切勿沿孔壁加樣,。
加樣:分別設(shè)空白孔,、標準孔、待測樣品孔,??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘,。
為保證實驗結(jié)果有效性,,每次實驗請使用新的標準品溶液。
棄去液體,,甩干,,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,,輕輕混勻,,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘,。
溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,洗板3次,,每次浸泡1-2分鐘,,200μl/每孔,甩干,。
每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液)100μl,,37℃,60分鐘,。
溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板5次,,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,,甩干,。
依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,,后3-4孔顯色不明顯,即可終止),。
依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結(jié)果的準確性,,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值),。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測,。
兔子細胞間粘附分子2 elisa檢測 檢測試劑盒