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產(chǎn)品簡介
上海恒遠生物長期供應高質(zhì)量“兔子C反應蛋白ELISA試劑盒"，本產(chǎn)品具有靈敏度高,，操作方便,，檢測速度快等優(yōu)點，種屬齊全,，物美價廉,，提供免費代測服務！,。
詳細介紹
兔子C反應蛋白 elisa原理 elisa kit
產(chǎn)品名稱：兔子C反應蛋白 ELISA試劑盒
英文名稱：rabbit C-Reactive Protein,CRP ELISA KIT
標本的采集及保存
1. 組織勻漿: 將動物的組織標本先用PBS洗滌,去除多余血液,勻漿化后放在20mlPBS中于-20° C放置過夜,第二天,經(jīng)過二次反復凍融破膜,將勻漿物5000x g離心5分鐘,取上清即可檢測,。
2. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：請1000 x g離心20分鐘,，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融,。
注：以上標本置4℃保存應小于1周，-20℃或-80℃均應密封保存,，-20℃不應超過1個月,，-80℃不應超過2個月；標本溶血會影響zui后檢測結果,，因此溶血標本不宜進行此項檢測,；高血脂的標本不需進行特殊處理，可直接檢測,。
操作步驟
實驗開始前,，請?zhí)崆芭渲坪盟性噭辉噭┗驑悠废♂寱r,，均需混勻,，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線,。如樣品濃度過高時,，均應用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍,。建議各實驗室在操作前先進行預實驗以建立*稀釋倍數(shù),。
1. 加樣：分別設空白孔、標準孔,、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100ul,，余孔分別加標準品或待測樣品100ul,，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜,，37℃反應120分鐘,。
為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液,。
2. 棄去液體,，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100ul（在使用前一小時內(nèi)配制）,，37℃,60分鐘,。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體,，甩干,，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘,，350ul/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100ul,，37℃,，60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘，350ul/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。
6. 依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi),，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）,。
7. 依序每孔加終止溶液50ul,，終止反應，此時藍色立轉黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液,。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）,。 在加終止液后立即進行檢測。
注：
1. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔（不同于空白孔）,，該孔不加任何試劑,，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零,。
2. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果,。所有試劑都必須在使用前達到室 溫。使用后立即冷藏保存試劑。
3. 洗板不正確可以導致不準確的結果,。在加入檢測溶液B或底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體,。為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),，酶標板加上蓋或覆膜,，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作,，避免酶標板長時間處于干燥狀態(tài),。
4. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值,。
5. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,。
6. 未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存,。標準品,、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,，請精確配置標準品及工作液,，盡量不要微量配置（如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10ul）,，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差,；檢測液A、B,，以及底物溶液在使用前,，應置于37℃溫育30分鐘；請勿重復使用已稀釋過的標準品,、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液,。
7. 建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性,。
兔子C反應蛋白 elisa原理 elisa kit