詳細介紹
植物赤霉素 elisa kit elisa原理
產(chǎn)品名稱:植物赤霉素ELISA試劑盒
英文名稱:Plant Gibberellic Acid,GA ELISA KIT
試劑盒操作步驟
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,,均需混勻,混勻時盡量避免起泡,。每次檢測都應(yīng)該做標準曲線,。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍,。加樣時,槍頭應(yīng)直接對準液面,,切勿沿孔壁加樣,。
加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔,、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘,。
為保證實驗結(jié)果有效性,,每次實驗請使用新的標準品溶液。
棄去液體,,甩干,,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,,輕輕混勻,,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘,。
溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板3次,,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,,甩干,。
每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液)100μl,37℃,,60分鐘,。
溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,,200μl/每孔,,甩干。
依序每孔加底物溶液90μl,,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔顯色不明顯,,即可終止),。
依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液,。
用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值),。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測,。
植物赤霉素 elisa kit elisa原理