詳細介紹
產品名稱:植物激素脫落酸ELISA試劑盒
英文名稱:Plant hormone abscisic acid,ABA ELISA KIT
Elisa實驗前的準備
1仔細閱讀說明書
2確定試劑盒在有效期內
3按說明書確定所有試劑齊全(數量,、體積)
4標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),,盡量分裝做備份,。短期內無法實驗者,注意低溫保存
5準備好所有實驗額外所需物品,,如試管,、吸頭、移液器,、離心機等
6根據檢測標本數量確定所需試劑的量
7按說明書將所用試劑平衡至室溫,,配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見技術指南
8選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,,必須識別不同表位的抗體,;從同一家公司選擇抗體對。
9ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定,。同時,,應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作,。
10標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,,注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前,,瞬時離心試劑瓶,,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節(jié),,將凍干的細胞因子復溶,。
11一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml??衫脴藴实腅LISA操作流程,、放大試劑盒、第三類試劑,、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內提高靈敏度,。
12為了優(yōu)化靈敏度,,建議過夜孵育標準品和標本。
13若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),,應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
14當測定混合液體中的抗原時,,如血清,,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig.
試劑盒需要而未提供的試劑和器材
標準規(guī)格酶標儀
高速離心機
電熱恒溫培養(yǎng)箱
干凈的試管和Eppendof管
系列可調節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,,用多通道移液器
蒸餾水,,容量瓶等
標本的采集及保存
血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可立即檢測,;或進行分裝,,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融,。解凍后的樣品應再次離心,,然后檢測。
血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,,標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000 g離心15分鐘,,取上清即可立即檢測;或進行分裝,,并將標本放于-20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融。解凍后的樣品應再次離心,,然后檢測,。
細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可立即檢測,;或進行分裝,,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融,。解凍后的樣品應再次離心,然后檢測,。
注:標本溶血會影響zui后檢測結果,,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
植物激素脫落酸 elisa檢測 elisa kit