詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:α-銀環(huán)蛇毒素ELISA試劑盒
英文名稱:α-bungarotoxin,α-BGT ELISA KIT
Elisa實驗前的準(zhǔn)備
1仔細(xì)閱讀說明書
2確定試劑盒在有效期內(nèi)
3按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
4標(biāo)本制備要規(guī)范,,每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備(貯存),,盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者,,注意低溫保存
5準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品,,如試管、吸頭,、移液器,、離心機(jī)等
6根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南
8選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進(jìn)行配對,;若選擇兩個單抗,,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對,。
9ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實驗中進(jìn)行彼此相抗的滴定,。同時,應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋,。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作,。
10標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,注意每批的細(xì)節(jié),。在使用細(xì)胞因子前,,瞬時離心試劑瓶,,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié),,將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶,。
11一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程,、放大試劑盒、第三類試劑,、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。
12為了優(yōu)化靈敏度,建議過夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本,。
13若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),,應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性,。
14當(dāng)測定混合液體中的抗原時,,如血清,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.
自備材料
1. 蒸餾水,。
2. 加樣器:5ul,、10ul、50ul,、100ul,、200、500ul,、1000ul,。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A,、B,。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗,。
2. 實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
操作注意事項
1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品
6. 洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7. 底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
8. 加入試劑的順序應(yīng)*,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9. 按照說明書中標(biāo)明的時間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
銀環(huán)蛇毒素 elisa kit elisa法