詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:小鼠腎損傷分子1試劑盒
使用范圍:科研
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
各種種屬:人,、大小鼠,、豚鼠、兔子,、豬,、犬、牛,、羊…
標(biāo)本齊全:血清,、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿,、組織液、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
經(jīng)營品牌:美國RD
保存條件:2-8℃
有效期:6個月
運(yùn)輸條件:低溫運(yùn)輸,,用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸。
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,,混勻時盡量避免起泡,。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。加樣時,槍頭應(yīng)直接對準(zhǔn)液面,,切勿沿孔壁加樣,。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
1.棄去液體,,甩干,不用洗滌,。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),,37℃,60分鐘,。
2.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,,200μl/每孔,,甩干。
3.每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,,37℃,,60分鐘。
4.溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板5次,,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,,甩干,。
5.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),,此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,,后3-4孔顯色不明顯,即可終止),。
6.依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
7.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值),。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測,。
實(shí)驗(yàn)備注:
1.用戶在初次使用試劑盒時,,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底,。
2.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及終止液,。測量時先用此孔調(diào)OD值至零,。
3.為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,。
4.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存,。標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素標(biāo)記抗體工作液、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用,。請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素標(biāo)記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液,。
5.建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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