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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
上海恒遠(yuǎn)“小鼠核因子κB亞基p65親和肽試劑盒"質(zhì)量保證,價(jià)格合理,科研專(zhuān)用,凡在本司購(gòu)買(mǎi)此試劑盒的客戶(hù),均可享受免費(fèi)代測(cè)服務(wù),，歡迎您： ,。負(fù)責(zé)人：張。更多產(chǎn)品的詳細(xì)信息歡迎登錄本公司個(gè)性化：http://www.spectrumchem.com
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱(chēng)：小鼠核因子κB亞基p65親和肽試劑盒
使用范圍：科研
產(chǎn)品規(guī)格：96人份/48人份
各種種屬：人,、大小鼠,、豚鼠、兔子,、豬,、犬、牛,、羊…
標(biāo)本齊全：血清,、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿,、組織液、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
經(jīng)營(yíng)品牌:美國(guó)ＲＤ
保存條件：2-8℃
有效期：６個(gè)月
運(yùn)輸條件：低溫運(yùn)輸,，用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸。
操作步驟：
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,，請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?，試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻,，混勻時(shí)盡量避免起泡,。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)允箻悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,。加樣時(shí)，槍頭應(yīng)直接對(duì)準(zhǔn)液面，切勿沿孔壁加樣,。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
1.棄去液體,，甩干,，不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl（取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,，輕輕混勻,，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），37℃,60分鐘,。
2.溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體，甩干,，洗板3次,，每次浸泡1-2分鐘，200μl/每孔,，甩干,。
3.每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同生物素標(biāo)記抗體工作液）100μl，37℃,，60分鐘。
4.溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘,，200μl/每孔，甩干,。
5.依序每孔加底物溶液90μl,，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,，后3-4孔顯色不明顯,，即可終止）。
6.依序每孔加終止溶液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液,。
7.用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)備注：
1.用戶(hù)在初次使用試劑盒時(shí),，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,，以便試劑集中到管底。
2.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,，該孔不加任何試劑,，只是zui后加底物溶液及終止液。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零,。
3.為防止樣品蒸發(fā),，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,。
4.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,，請(qǐng)于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素標(biāo)記抗體工作液,、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素標(biāo)記抗體工作液,、或辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。
5.建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。
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