詳細介紹
elisa實驗 elisa原理 小鼠組胺試劑盒
產(chǎn)品名稱:小鼠組胺試劑盒
英文名稱:Mouse Histamine,HIS ELISA KIT
使用范圍:科研
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
各種種屬:人,、大小鼠、豚鼠,、兔子,、豬、犬,、牛,、羊…
標本齊全:血清、血漿,、細胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿、組織液,、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
經(jīng)營品牌:美國RD
保存條件:2-8℃
有效期:6個月
運輸條件:低溫運輸,用干冰或者冰袋低溫運輸,。
試驗原理:
IL-1試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知IL-1濃度的標準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將IL-1和生物素標記的抗體同時溫育,。洗滌后,,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,,然后加入底物A、B,,和酶結(jié)合物同時作用,。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-1的濃度呈比例關(guān)系,。
操作步驟:
1.使用前,,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,,能使用復孔的盡量做復孔。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔,、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時,。
4.甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8.取出酶標板,,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應立即測定結(jié)果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值,。
結(jié)果 判 斷 與 分 析:
1,、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),,相應的IL-1標準品濃度為橫坐標(X),,做得相應的曲線,樣品的IL-1含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,。
3,、檢測值范圍:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
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