產(chǎn)品簡介
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上海恒遠生物科技有限公司 |
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elisa實驗 elisa原理 人尿蛋白試劑盒
產(chǎn)品名稱:人尿蛋白試劑盒
英文名稱:Human Proteinuria,UP ELISA KIT
使用范圍:科研
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
經(jīng)營品牌:RD、RB,、IBL
實驗方法:
酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
檢測原理:
采用雙抗體夾心 ABC-ELISA 法
ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法,、間接法、雙抗原夾心法,、IgM抗體捕捉法,、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響,,結(jié)果重復性較差,,質(zhì)量較難控制。
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量**,,即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異,,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保證保存條件,。嚴格執(zhí)行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復雜過程,,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性;對于效期短,、使用率低的試劑,,應當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,,避免反復凍融造成試劑的失效,。
標本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風濕因子,、補體,、異嗜性抗體、自身抗體,、溶菌酶等,,后者包括標本溶血、標本被細菌污染,、標本貯存時間過長,、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等,。
競爭法可用于測定抗原,,也可用于測定抗體,。以測定抗原為例,受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結(jié)合,,因此結(jié)合于固相的酶標抗原量與受檢抗原的量成反比,。操作步驟如下:
(1)將特異抗體與固相載體連接,,形成固相抗體,。洗滌。
?。?)待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液,,使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原,,則酶標抗原能順利地與固相抗體結(jié)合,。如受檢標本中含有抗原,則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結(jié)合,,競爭性地占去了酶標抗原與固相載體結(jié)合的機會,,使酶標抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標抗原,,保溫后,,酶標抗原與固相抗體的結(jié)合可達zui充分的量。洗滌,。
?。?)加底物顯色:參考管中由于結(jié)合的酶標抗原zui多,故顏色zui深,。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,,代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡,,表示標本中抗原含量越多。
Elisa間接法,、競爭法,、捕獲法,應用親和素和生物素的ELISA
親和素是一種糖蛋白,,可由蛋清中提取,。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,,可以和4個生物素分子親密結(jié)合?,F(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素。生物素又稱維生素H,,分子量244.31,,存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物,生物素-羥基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質(zhì),、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物,。親和素與生物素的結(jié)合,雖不屬免疫反應,,但特異性強,,親和力大,兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定,。由于1個親和素分子有4個生物素分子的結(jié)合位置,,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類似晶格的復合體,。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯(lián)起來,,就可大大提高ELISA的敏感度。
上海恒遠生物科技有限公司是一家專業(yè)供應生物試劑,、elisa試劑盒,、抗體、標準品的公司,,是一家經(jīng)國家相關(guān)部門批準注冊的企業(yè),。主要銷售許多較高水平的產(chǎn)品,包括各種試劑,,elisa試劑盒,,氨基酸、蛋白質(zhì),、碳水化合物,、植物激素、表面活性劑,、緩沖液,、抗生素、維生素和酶類,抗體抗原,,標準對照品等及應用領(lǐng)域等產(chǎn)品,,產(chǎn)品全國地區(qū) ,銷售額逐年穩(wěn)步提高,。擁有雄厚的實力,、合理的價格和優(yōu)良的服務(wù),能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求,,與國內(nèi)多家企業(yè)建立了良好的長期合作關(guān)系,,在市場上樹立了公司的良好信譽和形象:在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過不懈的努力,,已成為國內(nèi)生命科學領(lǐng)域產(chǎn)品的主要公司之一,。
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