詳細(xì)介紹
elisa kit elisa原理 人基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白試劑盒
產(chǎn)品名稱:人基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白試劑盒
英文名稱:Human Matrix Gla Protein,MGP ELISA KIT
使用范圍:科研
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
各種種屬:人,、大小鼠、豚鼠、兔子,、豬,、犬,、牛,、羊…
標(biāo)本齊全:血清、血漿,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿、組織液,、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
經(jīng)營品牌:美國RD
保存條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
運(yùn)輸條件:低溫運(yùn)輸,用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸,。
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DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南:
1,、選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì);若選擇兩個(gè)單抗,,必須識(shí)別不同表位的抗體,;從同一家公司選擇抗體對(duì)。
2,、ELISA實(shí)驗(yàn)中為了確定*信號(hào)和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定,。同時(shí),應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋,。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作,。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,,注意每批的細(xì)節(jié),。在使用細(xì)胞因子前,瞬時(shí)離心試劑瓶,,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子,。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié),將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶,。
4,、一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程,、放大試劑盒、第三類試劑,、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。
5、為了優(yōu)化靈敏度,建議過一夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本,。
6,、若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性,。
7、當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí),,如血清,,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig。
試劑盒組成及試劑配制:
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔),。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品),。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶,。
6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)規(guī)則:
1,、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定,。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
2,、要配備20ul,、50ul、100ul,、1000ul和排槍各一支,。吸取不同的液體后,要更換槍頭,。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),。
3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
4,、實(shí)驗(yàn)時(shí),,要使底物避光保存,。
5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確,。
6、吸取液體時(shí),,要用量程和需要量接近的槍去吸,,減少誤差。
操作程序總結(jié):
1.準(zhǔn)備試劑,,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
2.加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,,37℃反應(yīng)30分鐘
3.洗板5次,加入酶標(biāo)試劑,,37℃反應(yīng)30分鐘
4.洗板5次,加入顯色液A,、B,,37℃反應(yīng)10分鐘
5.加入終止液
6.15分鐘之內(nèi)度OD值
7.計(jì)算
上海恒遠(yuǎn)生物有限公司大量供應(yīng)ELISA試劑盒(RD ELISA Kit Omega ELISA Kit),抗體(兔單抗,、鼠單抗,、分裝抗體、免疫組化抗體,、二抗,、標(biāo)簽抗體),細(xì)胞(ATCC原代細(xì)胞,、培養(yǎng)基,、正常細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞),,生化試劑(氨基酸,、緩沖劑、分離試劑,、培養(yǎng)基,、蛋白質(zhì)、酶,、生化酶及輔酶,、核酸及其衍生物、碳水化和物,、抗生素,、染色劑、維生素試劑),。歡迎您,。
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