詳細(xì)介紹
elisa實(shí)驗(yàn) elisa檢測 人免疫球蛋白A試劑盒
產(chǎn)品名稱:人免疫球蛋白A試劑盒
英文名稱:Human Immunoglobulin A,IgA ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
保存條件:2-8℃
檢測方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
產(chǎn)品用途:For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免費(fèi)代測服務(wù).
產(chǎn)品種屬齊全有:人,,小鼠,,大鼠,豚鼠,豬,,犬,,兔,牛,,羊,,猴,兔,,馬等動物種屬,。
待檢樣本:體液,血清,,血漿,,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,尿液,,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等,。
DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南:
1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進(jìn)行配對,;若選擇兩個單抗,,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對,。
2,、ELISA實(shí)驗(yàn)中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時,,應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋,。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。
3,、標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,,注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前,,瞬時離心試劑瓶,,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié),,將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶,。
4、一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml,??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒,、第三類試劑,、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
5、為了優(yōu)化靈敏度,,建議過一夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本,。
6、若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),,應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7,、當(dāng)測定混合液體中的抗原時,,如血清,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig,。
試劑盒組成及試劑配制:
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔),。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶,。
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶,。
6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4),。
Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)規(guī)則:
1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,,誤差不能超過2%,。可用水和電子天平進(jìn)行確定,。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正,。
2、要配備20ul,、50ul,、100ul、1000ul和排槍各一支,。吸取不同的液體后,,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時,。
3,、要在實(shí)驗(yàn)前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,,以使結(jié)果更穩(wěn)定,。
4、實(shí)驗(yàn)時,要使底物避光保存,。
5,、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確,。
6,、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,,減少誤差,。
操作程序總結(jié):
1.準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
2.加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,,37℃反應(yīng)30分鐘
3.洗板5次,,加入酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)30分鐘
4.洗板5次,,加入顯色液A,、B,37℃反應(yīng)10分鐘
5.加入終止液
6.15分鐘之內(nèi)度OD值
7.計算
上海恒遠(yuǎn)生物有限公司大量供應(yīng)ELISA試劑盒(RD ELISA Kit Omega ELISA Kit),,抗體(兔單抗,、鼠單抗、分裝抗體,、免疫組化抗體,、二抗、標(biāo)簽抗體),,細(xì)胞(ATCC原代細(xì)胞,、培養(yǎng)基、正常細(xì)胞,、腫瘤細(xì)胞),,生化試劑(氨基酸、緩沖劑,、分離試劑,、培養(yǎng)基、蛋白質(zhì),、酶,、生化酶及輔酶、核酸及其衍生物,、碳水化和物,、抗生素、染色劑,、維生素試劑),。歡迎您,。
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