詳細介紹
elisa實驗 elisa法 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類試劑盒
產(chǎn)品名稱:人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類試劑盒
英文名稱:Human major histocompatibility complex Ⅰ,MHCⅠ/HLAⅠ ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
保存條件:2-8℃
檢測方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
產(chǎn)品用途:For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免費代測服務(wù).
產(chǎn)品種屬齊全有:人,,小鼠,大鼠,,豚鼠,,豬,犬,,兔,,牛,羊,,猴,,兔,馬等動物種屬,。
待檢樣本:體液,血清,血漿,,細胞培養(yǎng)上清液,,尿液,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等,。
DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南:
1,、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,,必須識別不同表位的抗體,;從同一家公司選擇抗體對。
2,、ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定,。同時,應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準品的系列稀釋,。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作,。
3、標(biāo)準品的配制:對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書,,注意每批的細節(jié),。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,,盡可能多地收回其中的細胞因子,。根據(jù)每批說明書中的細節(jié),將凍干的細胞因子復(fù)溶,。
4,、一般待測抗原標(biāo)準曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml??衫脴?biāo)準的ELISA操作流程,、放大試劑盒、第三類試劑,、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。
5、為了優(yōu)化靈敏度,,建議過一夜孵育標(biāo)準品和標(biāo)本,。
6、若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),,應(yīng)嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7,、當(dāng)測定混合液體中的抗原時,,如血清,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig。
試劑盒組成及試劑配制:
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔),。
2. 標(biāo)準品(Standard):2瓶(凍干品),。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶,。
6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
Elisa試劑盒實驗規(guī)則:
1,、要保證移液槍的準確性,,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定,。但有專業(yè)人員進行矯正。
2,、要配備20ul,、50ul、100ul,、1000ul和排槍各一支,。吸取不同的液體后,要更換槍頭,。即使是吸取標(biāo)準品時,。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
4,、實驗時,,要使底物避光保存。
5,、用槍吸取液體時速度不能太快,,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
6,、吸取液體時,,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差,。
操作程序總結(jié):
1.準備試劑,,樣品和標(biāo)準品
2.加入準備好的樣品和標(biāo)準品,,37℃反應(yīng)30分鐘
3.洗板5次,加入酶標(biāo)試劑,,37℃反應(yīng)30分鐘
4.洗板5次,,加入顯色液A,、B,,37℃反應(yīng)10分鐘
5.加入終止液
6.15分鐘之內(nèi)度OD值
7.計算
上海恒遠生物有限公司大量供應(yīng)ELISA試劑盒(RD ELISA Kit Omega ELISA Kit),抗體(兔單抗,、鼠單抗,、分裝抗體、免疫組化抗體,、二抗,、標(biāo)簽抗體),細胞(ATCC原代細胞,、培養(yǎng)基,、正常細胞、腫瘤細胞),,生化試劑(氨基酸,、緩沖劑、分離試劑,、培養(yǎng)基,、蛋白質(zhì)、酶,、生化酶及輔酶,、核酸及其衍生物、碳水化和物,、抗生素,、染色劑、維生素試劑),。歡迎您,。
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