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人基質(zhì)金屬蛋白酶13試劑盒
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  • 人基質(zhì)金屬蛋白酶13試劑盒

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貨物所在地: 上海上海市
產(chǎn)地: 美國
更新時間: 2025-01-14 21:00:07
期: 2025年1月14日--2025年7月14日
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產(chǎn)品簡介

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詳細介紹

elisa實驗    elisa法   人基質(zhì)金屬蛋白酶13試劑盒

產(chǎn)品名稱:人基質(zhì)金屬蛋白酶13試劑盒
英文名稱:Human Matrix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA KIT
種屬:人
使用范圍:科研
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
各種種屬:人,、大小鼠、豚鼠,、兔子,、豬、犬,、牛,、羊…
標(biāo)本齊全:血清、血漿,、細胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿、組織液,、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
經(jīng)營品牌:RD、RB,、IBL
保存條件:2-8℃
有效期:6個月
運輸條件:低溫運輸,,用干冰或者冰袋低溫運輸。
試劑器材
  1. 試劑
 ?。?) 包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
    NaCO3 1.59克 NaHCO3  2.93克  加蒸餾水至1000ml  
    (2) 洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4?12H2O 2.9克 NaCl  8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸餾水至1000ml
 ?。?) 稀釋液:牛血清白蛋白(BSA) 0.1克 加洗滌緩沖液至100ml 或以羊血清、兔血清等 血清與洗滌液配成5~10%使用,。
  (4) 終止液(2M H2SO4):蒸餾水178.3ml,,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml,。
  (5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml 0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml 加蒸餾水50ml。
 ?。?) TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml無水乙醇) 0.5ml底物緩沖液(PH5.5) 10ml0.75%H2O2 32μl
 ?。?) ABTS使用液:ABTS 0.5mg 底物緩沖液(PH5.5) 1ml 3%H2O2 2μl
  (8) 抗原,、抗體和酶標(biāo)記抗體,。
  (9) 正常人血清和陽性對照血清,。
  2. 器材:
 ?。?) 聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標(biāo)板)40孔或96孔,ELISA檢測儀,,50μl及100μl加樣器,,塑料滴頭,小毛巾,,洗滌瓶,。
  (2) 小燒杯,、玻璃棒,、試管、吸管和量筒等,。
 ?。?) 4℃冰箱,37℃孵育箱,。
注意事項
  1. 正式試驗時,,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉。
  2. 在ELISA中,,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,,其中包括:
  (1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
 ?。?) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時,。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,,在其它試驗條件相同時,,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml,。
  (3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
 ?。?) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護,。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入,。

上海恒遠生物主營范圍:ELISA試劑盒,,生物試劑,,血清,,抗體,,上海恒遠生物科技有限公司是屬于國內(nèi)合資企業(yè),,也是生命科學(xué)試劑的運營商,本公司專業(yè)代理國內(nèi)外生命科學(xué)試劑產(chǎn)品,,產(chǎn)品范圍涉及細胞生物學(xué),,分子生物學(xué),免疫學(xué)及生物化學(xué)等實驗室科學(xué)研究試劑,,包括細胞系,,細胞培養(yǎng),ELISA和免疫組化抗體,,一抗,,二抗,單克隆和多克隆抗體,,咨詢了解本司更多產(chǎn)品,。


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