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產(chǎn)品簡介
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詳細(xì)介紹
elisa實驗 elisa kit 人丙酮酸激酶M2型同工酶試劑盒
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操作步驟
實驗開始前,，請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,，均需混勻,，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線,。如樣品濃度過高時,，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍,。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡,，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,，37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
2. 棄去液體，甩干,，不用洗滌,。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻,，在使用前一小時內(nèi)配制）,，37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板3次,，每次浸泡1-2分鐘,，350μl/每孔，甩干,。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同生物素標(biāo)記抗體工作液） 100μl,，37℃，60分鐘,。
5. 溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體，甩干,，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔,，甩干,。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi),，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,，后3-4孔梯度不明顯,，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液,。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測,。
注：
1. 用戶在初次使用試劑盒時,，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底,。
2. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4,。測量時先用此孔調(diào)OD值至零,。
3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,。
4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請于2-8℃保存,。標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素標(biāo)記抗體工作液、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用,。請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素標(biāo)記抗體工作液或,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液,。
5. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,。
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司是一家專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的企業(yè),，企業(yè)經(jīng)營進(jìn)出口生物試劑等，所經(jīng)營銷售的范圍也在日益的增長和擴(kuò)大,。在常規(guī)試劑和中間體的基礎(chǔ)上也包括實驗儀器,、消耗品、普通器材,分子生化試劑,、免疫試劑和細(xì)胞培養(yǎng)試劑等,，在滿足試驗和生產(chǎn)的常規(guī)需求以外,逐漸過渡到應(yīng)用于廣大的研究機(jī)構(gòu)和嶄新課題.由單一的試劑供應(yīng)過渡到可以根據(jù)客戶需求,提供*的定制加工和全線的產(chǎn)品推薦,選擇采購服務(wù)。直銷的關(guān)鍵是銷售（機(jī)會和產(chǎn)品）,，銷售的重點是產(chǎn)品,，產(chǎn)品的核心是價格,。價格平民化就意味著競爭優(yōu)勢。上海恒遠(yuǎn)生物有限公司強(qiáng)調(diào),，讓消費者買的便宜,、物超所值。 我們相信,在不懈的努力下,一定會把上海恒遠(yuǎn)建成集生產(chǎn),、研究開發(fā)和銷售于一體的國內(nèi)外的*企業(yè),。咨詢。
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