詳細(xì)介紹
elisa實驗 elisa法 人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶試劑盒
產(chǎn)品名稱:人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶試劑盒
英文名稱:Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase,PPI ELISA KIT
種屬:人
使用范圍:科研
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
各種種屬:人,、大小鼠、豚鼠,、兔子,、豬、犬,、牛,、羊…
標(biāo)本齊全:血清、血漿,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿、組織液,、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
經(jīng)營品牌:美國RD RB?。桑拢?br />保存條件:2-8℃
有效期:6個月
運輸條件:低溫運輸,,用干冰或者冰袋低溫運輸。
Elisa實驗前的準(zhǔn)備
1仔細(xì)閱讀說明書
2確定試劑盒在有效期內(nèi)
3按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
4標(biāo)本制備要規(guī)范,,每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備(貯存),,盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者,,注意低溫保存
5準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品,,如試管,、吸頭,、移液器、離心機(jī)等
6根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7按說明書將所用試劑平衡至室溫,,配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南
8選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進(jìn)行配對,;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體,;從同一家公司選擇抗體對,。
9ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實驗中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時,,應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋,。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。
10標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,,注意每批的細(xì)節(jié),。在使用細(xì)胞因子前,瞬時離心試劑瓶,,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子,。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié),將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶,。
11一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml,。可利用標(biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程,、放大試劑盒,、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。
12為了優(yōu)化靈敏度,,建議過夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。
13若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),,應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
14當(dāng)測定混合液體中的抗原時,,如血清,,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.
ELISA原理
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù),。由于抗原,、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性,。在實際應(yīng)用中,,通過不同的設(shè)計,具體的方法步驟可有多種,。即:用于檢測抗體的間接法(圖a),、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法,。
樣品采集:
收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,,將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融,。標(biāo)本2-8℃可保存48小時,,-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月,。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶,。
上海恒遠(yuǎn)生物主營范圍:ELISA試劑盒,生物試劑,,血清,,抗體,上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司是屬于國內(nèi)合資企業(yè),,也是生命科學(xué)試劑的運營商,,本公司專業(yè)代理國內(nèi)外生命科學(xué)試劑產(chǎn)品,產(chǎn)品范圍涉及細(xì)胞生物學(xué),,分子生物學(xué),,免疫學(xué)及生物化學(xué)等實驗室科學(xué)研究試劑,包括細(xì)胞系,,細(xì)胞培養(yǎng),,ELISA和免疫組化抗體,一抗,,二抗,,單克隆和多克隆抗體,咨詢了解本司更多產(chǎn)品,。
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