詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:人瘦素試劑盒
英文名稱:Human Leptin,LEP ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
保存條件:2-8℃
檢測方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
經(jīng)營種類:進(jìn)口分裝和原裝
主要作用:科研
Elisa實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備
1仔細(xì)閱讀說明書
2確定試劑盒在有效期內(nèi)
3按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
4標(biāo)本制備要規(guī)范,,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),,盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者,,注意低溫保存
5準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,,如試管,、吸頭、移液器,、離心機(jī)等
6根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7按說明書將所用試劑平衡至室溫,,配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南
8選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì);若選擇兩個(gè)單抗,,必須識(shí)別不同表位的抗體,;從同一家公司選擇抗體對(duì)。
9ELISA實(shí)驗(yàn)中為了確定*信號(hào)和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定,。同時(shí),,應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作,。
10標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,,注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前,,瞬時(shí)離心試劑瓶,,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié),,將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶,。
11一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程,、放大試劑盒、第三類試劑,、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。
12為了優(yōu)化靈敏度,建議過一夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本,。
13若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),,應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性,。
14當(dāng)測定混合液體中的抗原時(shí),,如血清,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.
ELISA原理
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),,將抗原,、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原,、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性,。在實(shí)際應(yīng)用中,,通過不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種,。即:用于檢測抗體的間接法(圖a),、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法,。
樣品采集:
收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融,。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),,-20℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月,。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶,。
上海恒遠(yuǎn)生物主營范圍:ELISA試劑盒,生物試劑,,血清,,抗體,上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司是屬于國內(nèi)合資企業(yè),,也是生命科學(xué)試劑的運(yùn)營商,,本公司專業(yè)代理國內(nèi)外生命科學(xué)試劑產(chǎn)品,產(chǎn)品范圍涉及細(xì)胞生物學(xué),,分子生物學(xué),,免疫學(xué)及生物化學(xué)等實(shí)驗(yàn)室科學(xué)研究試劑,包括細(xì)胞系,,細(xì)胞培養(yǎng),,ELISA和免疫組化抗體,一抗,,二抗,,單克隆和多克隆抗體,,咨詢了解本司更多產(chǎn)品,。