詳細介紹
●ELISA試劑盒,,ELISPOT試劑盒
人丙酮酸激酶試劑盒 Human pyruvate kinase,PK ELISA KIT
可測種屬:人,、大小鼠、豚鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬…
可測標本:血清,、血漿、細胞上清液,、尿液,、體液,、灌洗液
規(guī)格:96T/48T 中英文雙版說明書 提供代測 科研試劑
經(jīng)營品牌:RD RB IBL
人丙酮酸激酶試劑盒操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
16ng/L | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
8ng/L | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
4ng/L | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2ng/L | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
1ng/L | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同),、標準孔、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復5次,,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
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