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人1,3-βD葡葡糖苷酶試劑盒96T/48T 均備現貨!
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人1,3-βD葡葡糖苷酶試劑盒操作步驟
實驗開始前,,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,,混勻時盡量避免起泡,。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,,用樣品稀釋液進行稀釋,,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔,、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,,37℃反應120分鐘,。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液,。
2. 棄去液體,,甩干,不用洗滌,。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),,37℃,60分鐘,。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,,甩干,,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,,37℃,,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,,棄去孔內液體,甩干,,洗板5次,,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,,甩干,。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,,后3-4孔梯度不明顯,,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應(此時藍色立轉黃色),。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,,底物反應時間到后應盡快加入終止液,。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測,。
注:
1. 用戶在初次使用試劑盒時,,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底,。
2. 每次實驗留一孔作為空白調零孔,,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4,。測量時先用此孔調OD值至零,。
3. 為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,,酶標板加上蓋或覆膜,。
4. 未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存,。標準品,、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用,。請勿重復使用已稀釋過的標準品,、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液,。
5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定,,以保證檢測結果的準確性。
“"可檢測樣本:血液標本,,組織液標本,,尿液標本,糞便標本,,腦脊液標本,,胸腹水標本等(具體詳細情況請咨詢)。