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關(guān)于血清這四個疑惑是您該清楚了解的!
閱讀:954 發(fā)布時間:2017-12-41.為什么要熱滅活血清?有必要做熱滅活嗎,?
恒遠(yuǎn)生物答:56℃加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng),。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,,細(xì)胞和血小板釋放組胺,,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,,培養(yǎng)ES細(xì)胞,,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時,推薦使用熱滅活血清,。
實驗顯示,,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或*沒有任何作用,,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,,而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,,沉淀物的形成會顯著的增多,,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,,而把血清放在37℃環(huán)境中,,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增,。
2.如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損,?
恒遠(yuǎn)生物答:解凍血清時,,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),,實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物,。解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生。請勿將血清置于37℃太久,,若在37℃放置太久,,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,,而影響血清的質(zhì)量,。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,,可以無須做此步驟,。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,,30分鐘的原則,,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,,時間過久或搖晃不均勻,,都會造成沉淀物的增多。
3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理,?
恒遠(yuǎn)生物答:血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后也會存在于血清中,,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,,并不影響血清本身的質(zhì)量,。若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,以400g離心,,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因為它可能會阻塞您的過濾膜,。
4.保存血清的方法是什么?
恒遠(yuǎn)生物答:建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,。若存放于4℃,,請勿超過一個月,。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至無菌離心管內(nèi),,再放回冷凍,。