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雙抗體夾心法檢測HBsAg試劑盒
閱讀:1706 發(fā)布時間:2016-7-12關(guān)鍵詞:HBsAg試劑盒ELISA 簡介:ELISA法定量測定人血清,、血漿或其它相關(guān)液體中ACA IgA含量,。 產(chǎn)品報價說明: 產(chǎn)品名稱:HBsAg試劑盒ELISA 規(guī)格:96T/48T 運(yùn)輸:2~8°保存運(yùn)輸 服務(wù):提供免費(fèi)代測服務(wù),提供,。
以已知抗體(抗HBs)包被載體,,然后將含有抗原的待檢標(biāo)本加入,,共同孵育后,抗原結(jié)合于包被抗體上,,再加入酶標(biāo)記特異抗體(酶標(biāo)抗HBs),,酶標(biāo)抗體連接到抗原上,zui后加入底物溶液,,根據(jù)顏色反應(yīng)來判定抗原含量,。
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中乙肝表面抗原ELISA試劑盒(HBsAg)含量,。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用間接法測定標(biāo)本中人乙肝表面抗原(HBsAg)水平,。用純化的人乙肝表面抗原(HBsAg)抗體包被微孔板,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的乙肝表面抗原(HBsAg)標(biāo)準(zhǔn)品和未知濃度的HBsAg待檢樣品,,溫育后,加入生物素標(biāo)記的抗IgG抗體,,再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的乙肝表面抗原(HBsAg)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人乙肝表面抗原(HBsAg)濃度,。
一,、材料
HBsAg試劑盒,本試劑盒含:
1,、包被抗-HBs反應(yīng)條 1瓶
2,、酶結(jié)合物 1瓶
3、HBsAg陽性對照 1瓶
4,、HBsAg陰性對照 1瓶
5,、洗滌液:用前每瓶作1:20稀釋 1瓶
6、顯色劑(TMB)A 1瓶
7,、顯色劑(TMB)B 1瓶
8,、終止液 1瓶
二、方法
1,、加入待測標(biāo)本每孔0.05ml,,并設(shè)HBsAg陽性對照2孔,HBsAg陰性對照2孔,,空白對照1孔,,然后加入酶結(jié)合物每孔1滴(0.05ml,、空白對照孔不加),充分混勻后置37℃孵育30分鐘,。
2,、洗板:棄去反應(yīng)條孔內(nèi)液體、拍干,、用洗滌液注滿每孔,,棄去拍干,反復(fù)五次后拍干,。
3,、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml),然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml),,混勻,,37℃孵育10分鐘。
4,、每孔加終止液1滴(0.05ml),,混勻。
三,、結(jié)果
比色法:波長450nm,,先用空白孔校零點(diǎn),然后讀取各孔光密度值,。
樣品OD值/陰性對照平均OD值≥ 2.1判斷為陽性,,否則為陰性。
備注:陰性對照平均OD值低于0.05作0.05計算,,高于0.05按實際OD值計算,。陽性對照OD值≥0.8,實驗結(jié)果有效,。
四,、注意事項
1、試劑盒置2℃~8℃保存,。
2,、使用前試劑應(yīng)搖勻,并棄去1~2滴后垂直滴加,。
3,、從冷藏環(huán)境中取出試劑盒內(nèi)全部瓶裝試劑及待測標(biāo)本所需微孔條,置室溫平衡30分鐘后再行測試,,余者應(yīng)及時封存于冰箱中以備后用,。
4、待測標(biāo)本不可用NaN3防腐,。
5,、不同批號試劑請勿通用,。
6、結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成,。
7,、若濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶時,請置37℃至溶解,。