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    近期開始,，眾多從事醫(yī)學(xué),、生命科學(xué),、動(dòng)物學(xué),、植物學(xué)等碩士研究生即將迎來他們的畢業(yè)課題,。其中不乏有真正沒有自己獨(dú)立操作過ELISA實(shí)驗(yàn)的新手。而即將迎來的畢業(yè)課題將又不得不靠自己獨(dú)立完成,。在此,。我司技術(shù)部歐陽技術(shù)總結(jié)ELISA實(shí)驗(yàn)操作易走的誤區(qū)。希望能夠幫助到廣大科研新手順利完成實(shí)驗(yàn),、順利畢業(yè),。

 ①：液體全部加入酶標(biāo)孔后，將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,，使液體充分混合均勻,，也使其得到充分的反應(yīng)。

    ②：盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,，又能反映出試劑盒的精密度。

    ③：手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后,。應(yīng)靜置15～30s,，不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中，防止交叉污染,。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干,。

    ④：將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,，可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸,，液滴會自然流下去。吸入液體時(shí)的的方法是吸兩檔打一檔,，防止由于槍頭的毛細(xì)作用使得部分液體不能流出而造成的誤差,。

    ⑤：由于底物顯色劑對光及其敏感，因此要避光保存,。

    ⑥：底物為TMB,，避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,，應(yīng)盡量避免接觸皮膚,。

    ⑦：要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性，可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),，溫度環(huán)境為20%左右時(shí),，lmL的水可以看作是lg、20L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定,。

    ⑧：實(shí)驗(yàn)前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,，使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同，酶標(biāo)板只要取出所需量,。

    ⑨：孵育時(shí)要使蓋板膜封好酶標(biāo)板,，防止水分蒸發(fā),，以防曲線不成線性。

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