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東南大學(xué)劉老師咨詢細胞裂解液檢測IL-24指標樣本收集問題
閱讀:736 發(fā)布時間:2015-12-162015年三月份東南大學(xué)張同學(xué)在我司代測了人IL-24 ELISA試劑盒,,現(xiàn)張同學(xué)的實驗課題已圓滿結(jié)束,。同實驗室學(xué)生劉同學(xué)受張同學(xué)介紹昨日我司銷售部吳,,準備近期同樣做人IL-24 ELISA試劑盒的課題檢測,。準備收集人的細胞裂解液樣本做檢測,。關(guān)于樣本的收集方法希望得到我司的,。溝通結(jié)束后,,我司技術(shù)部以WORD文檔形式詳細整理了細胞裂解液的收集方法答復(fù)劉老師。劉老師也表示,,樣本預(yù)計半個月左右收集完成,,收集完成后將樣本交由我司進行代測。期間任何技術(shù)問題我司*時間提供,。
細胞裂解液收集方法:
1).吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,,用胰酶消化細胞,加適量培養(yǎng)基將細胞從培養(yǎng)板上吹下來,。懸浮細胞可省略,。
2).收集細胞懸液,1000×g離心10min,,棄去培養(yǎng)基,,用預(yù)冷的PBS潤洗3次,。
3) .加入適量的預(yù)冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通常6孔板一個孔的細胞量需要150~250μL PBS重懸,。
4).將樣品放入-20℃或-80℃,,使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,,反復(fù)凍融幾次,,使細胞充分裂解。也可將樣品進行超聲破碎,,以達到裂解的目的,。
5).4℃ 10000×g 離心10min,除去細胞碎片,,取上清,,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融,。