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蘇木素HE 染色月底*
閱讀:918 發(fā)布時(shí)間:2015-9-22上海恒遠(yuǎn)生物生產(chǎn)的蘇木素染色液(Hematoxylin Staining Solution)綜合了多種經(jīng)典的蘇木素染色方法,,例如Harris法,、Mayer法等,簡(jiǎn)化了操作步驟,縮短了操作時(shí)間,,并且染色液內(nèi)不使用汞,、甲醇等有毒試劑??梢杂糜诮M織切片或培養(yǎng)細(xì)胞的染色,。桂花飄香之日開啟月底*活動(dòng),詳情請(qǐng),。
本蘇木素染色液染色后細(xì)胞核呈藍(lán)色,。
本染色液可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。一方面可以在本蘇木素染色液染色后進(jìn)行免疫熒光染色或其它染料的染色,,另一方面也可以在免疫組化染色后再進(jìn)行蘇木素復(fù)染,。
本染色液可以重復(fù)使用,直至認(rèn)為效果不佳時(shí)再換用新的染色液,。一個(gè)包裝的本染色液至少可以染色
200個(gè)樣品,。蘇木素(Hematoxylin)和伊紅( Eosin)染色,簡(jiǎn)稱HE 染色,,是病理學(xué)常規(guī)制片中zui基本的染色方法,,應(yīng)用機(jī)器廣泛。蘇木精是從原產(chǎn)中南美的洋蘇木中提取出來(lái)的淺黃褐色的結(jié)晶,,是一種堿性染色劑,,它在被氧化后生成蘇木素,同媒染劑(常用的是三價(jià)的鋁或鹽鐵)一起使用,,能夠使細(xì)胞核染色,。在病理診斷、教學(xué)和科研工作中,,常用HE 染色對(duì)正常組織和病變組織進(jìn)行形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察,。對(duì)于確定或鑒別病變組織、細(xì)胞中出現(xiàn)的某些異常物質(zhì)與特殊成分,,而需要采用的特殊染色方法,、酶組織化學(xué)方法、免疫組織化學(xué)方法等也均是在觀察HE 染色組織切片的基礎(chǔ)上進(jìn)行的,。在HE 染色的組織切片中,,細(xì)胞核呈藍(lán)色,細(xì)胞漿呈紅色,,二者形成鮮明的對(duì)比,,易于觀察分析。蘇木素伊紅染色試劑盒中,,蘇木素染色液采用進(jìn)口的高純度蘇木精,、硫酸鋁鉀,、甘油等組成,甲醇等有害物質(zhì),,對(duì)細(xì)胞核染色效果好,。其特點(diǎn):長(zhǎng)期保存,不易產(chǎn)生沉淀和金屬; 應(yīng)用范圍廣,,可以用于人,、動(dòng)物、畜牧,、水產(chǎn)等領(lǐng)域,,可以用于組織石蠟切片、冰凍切片和組織細(xì)胞的染色等,;蘇木素染色液可以重復(fù)使用,。
染色原理:
1、細(xì)胞核染色的原理:
蘇木素為堿性天然染料,,可使細(xì)胞核著色,。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中,,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,,使DNA 雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木素在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。
2,、細(xì)胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,在一定條件下可使細(xì)胞漿著色,。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),,為兩性化合物,,細(xì)胞漿的染色與染液的pH 值密切相關(guān),。當(dāng)染液的pH 值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7~5.0)以下時(shí),胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,,則細(xì)胞漿帶正電荷,,就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽(yáng)離子結(jié)合,,使細(xì)胞漿著色,呈現(xiàn)紅色,。
3,、分化作用:
染色后,用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,這個(gè)過程稱為分化作用,,所用的溶液稱為分化液,。在HE 染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),,使組織與色素分離而退色,。經(jīng)蘇木素染色后,必須用1%鹽酸乙醇分化,,使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木素染料脫去,,再進(jìn)行伊紅染色,才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明,。
4,、返藍(lán)作用:
分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),,呈紅色,;在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),呈藍(lán)色,。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,,故分化之后,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,,再用弱堿性水使蘇木素染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,,這個(gè)過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來(lái)水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán),,但所需時(shí)間較長(zhǎng),。
注意事項(xiàng):
1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈,。
2,、95%乙醇、90%乙醇,、80%乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液,。
3、1%的鹽酸乙醇分化液的分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄,、組織的類別和1%的鹽酸乙醇分化液的新舊而定,,另外分化后自來(lái)水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠,以便*清洗酸,。
4,、乙-乙醇混合固定液是由醚和95%乙醇等量混合而得,再加入適量乙酸,,密閉保存,。
5,、冷凍切片染色時(shí)間盡量要短。
6,、促藍(lán)液常使用0.2~1%氨水水溶液或Scoot 促藍(lán)液或0.1~1%碳酸鋰水溶液,。
7、為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。
8、使用場(chǎng)所應(yīng)通風(fēng),,并遠(yuǎn)離火源,。
有效期: 12 個(gè)月有效。
中文名稱: 蘇木色精
其他中文名稱: 蘇木素,;蘇木色素,;蘇木精
蘇木素英文名稱: Hematoxylin
其他英文名稱: 7,11b-Dihydrobenz[b]inde,2-d]pyran-3,4,6a,9,10(6H)-pentol;C.I.75290,;Natural Black 1