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凍存過(guò)的全血為什么不建議再拿來(lái)做ELISA實(shí)驗(yàn)

閱讀:1631          發(fā)布時(shí)間:2015-9-16

很多ELISA實(shí)驗(yàn)新手客戶都會(huì)咨詢我司技術(shù)能否把全血提取出來(lái)放-70℃條件保存,,等實(shí)驗(yàn)開(kāi)展了(比如一個(gè)月左右的時(shí)間)再離心全血取血清或者血漿做ELISA實(shí)驗(yàn),?這種做法我司技術(shù)都是持反對(duì)建議的,。與此同時(shí),,也是明確要求我司銷(xiāo)售人員在與客戶售前溝通時(shí)建議老師全血樣本提取好了應(yīng)該及時(shí)離心出血清或者血漿,。并要求-70℃條件下保存,如果一個(gè)月左右可以開(kāi)展實(shí)驗(yàn)可以-20℃保存,,期間不能反復(fù)凍融,。至于凍存后的全血不可以再提取血清,、血漿樣本來(lái)做elisa的具體原因如下:

原因一,、全血凍存后解凍,用常規(guī)離心方式提取血清仍然是可以的,,*不利的一點(diǎn)是,,伴隨凍融的過(guò)程,會(huì)出現(xiàn)比較嚴(yán)重的溶血事件,。而zui后提取出來(lái)的血清能否做elisa,,主要取決于溶血程度、你所要檢測(cè)的目標(biāo)蛋白的性質(zhì)及你實(shí)驗(yàn)的zui終目的,。

原因二,、溶血釋放的胞內(nèi)組分往往容易影響本底,,甚至出現(xiàn)假陽(yáng)性;而蛋白酶的釋放可能導(dǎo)致目的蛋白的降解zui終影響結(jié)果,;目的蛋白的大小,、穩(wěn)定性、特異性(相對(duì)抗體而言)又影響其自身與酶標(biāo)板的吸附,、自身降解,、自身與抗體的結(jié)合率等等。以上各種不確定性因素存在下,,如果你只是對(duì)血清中某種血清蛋白做定性檢測(cè)的話,,做elisa應(yīng)該問(wèn)題不大;若是定量分析的話,,從可靠性的角度上看,,不建議該做法。

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