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ELISA試驗做復孔問題介紹
閱讀：3329 發(fā)布時間：2015-5-25徐州醫(yī)學院附屬醫(yī)院崔老師由同事介紹我公司,，老師想做小鼠IL-6等相關指標的ELISA試驗,，老師介紹到樣本量收集的較少（18個樣本，總共分了6組,。不同組的樣本是不同藥物處理的）,，而試劑盒的zui小規(guī)格就是48T（48T可以檢測37個樣本，11孔做標準空白對照孔）,，我司銷售專員建議老師實驗可以做個復孔,，這樣的實驗報告結果會更加。
崔老師聽取了我司銷售專員的建議,，在設計ELISA復孔檢查時，提出問題：是對同一個樣品作兩次稀釋,，再分別加到板上的兩個孔,，還是只稀釋一次，然后吸取兩次分別加到兩個孔,？前者似乎把稀釋時的誤差也考慮到了,，但做出來的結果兩個孔相關挺大的。
我司技術答復：
采用后者,。如果在實驗室階段,，可能需要多次稀釋，然后將不同稀釋次數(shù)的分別做復孔,，以便檢查稀釋過程中帶來的誤差,；如果同一次稀釋的復孔一致的存在檢測差異大，可能ELISA板的均一性存在一定問題（排除操作因素）,。如果不同稀釋次數(shù)差異大,，說明稀釋方法有問題。
在ELISA實驗中設復孔,，目的是為了減少本次實驗的系統(tǒng)誤差對實驗數(shù)據帶來的影響,，所以應該用第二種，有條件的話復孔的數(shù)量可以增加,，系統(tǒng)誤差更小,。