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Elisa檢測中樣本OD值很低怎么辦,?
閱讀:2056 發(fā)布時間:2015-2-5zui近在做ELISA實驗,,購買的是RD公司的ELISA試劑盒,,*按照上面的說明書步驟去做,發(fā)現做出來的標準曲線還是可以的,,但是樣本OD值很低,,就是顯色很淡,不在標準曲線范圍之內,,而試劑盒zui低靈敏度是100PG/ML,。所以我訂的標準曲線zui高濃度是4000PG/ML,我的樣本是人血清,,而購買的試劑盒說明書說應用于細胞血清的測定,,用在人血清測定需要改變一些條件,但是本人摸索了一個多月,,還是沒能做出來,。我不知道問題出在哪里,zui近試著把標準品放在人血清里檢測,,得到的OD值也是很低0.1左右,,也不再曲線范圍,。為什么會這樣呢?我用的是1%BSA+PBS作為稀釋劑,,后面該用10%胎牛血清也是不行,。所以問問給位同仁,我的問題出現在哪里啊,,人家做ELISA,,很快就完成了,可我怎么那么做不出來呢,?
王同學可根據我司給出的建議:
1. 試劑盒沒有質量問題,,應該從樣品及保存上找原因。
2.你可以試試EDTA抗凝后取血漿檢測,。
3. 新鮮樣品檢測一下,,將標準品稀釋后加入血清或血漿中檢測(也就是用血清進一步稀釋標準品),觀察檢測結果,,判斷是否是血淸中有未知物質影響,。
4. 適當延長顯色時間。
5. 更換酶標儀,,排除儀器原因,。
6. 咨詢RD的,幫助找原因,。
7. 更換廠家試劑盒,,重新做。
上海恒遠生物專業(yè)代理Elisa試劑盒,,含稅含運費,,*進口試劑盒,RD試劑盒,,我司全面提供免費代測服務,,用于試劑盒生產的抗體全部美國進口。