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Elisa檢測中樣本OD值很低怎么辦,?
閱讀:2003 發(fā)布時間:2015-2-5zui近在做ELISA實驗,購買的是RD公司的ELISA試劑盒,,*按照上面的說明書步驟去做,,發(fā)現(xiàn)做出來的標(biāo)準(zhǔn)曲線還是可以的,但是樣本OD值很低,,就是顯色很淡,,不在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍之內(nèi),而試劑盒zui低靈敏度是100PG/ML,。所以我訂的標(biāo)準(zhǔn)曲線zui高濃度是4000PG/ML,,我的樣本是人血清,而購買的試劑盒說明書說應(yīng)用于細胞血清的測定,,用在人血清測定需要改變一些條件,,但是本人摸索了一個多月,還是沒能做出來,。我不知道問題出在哪里,,zui近試著把標(biāo)準(zhǔn)品放在人血清里檢測,得到的OD值也是很低0.1左右,,也不再曲線范圍,。為什么會這樣呢?我用的是1%BSA+PBS作為稀釋劑,,后面該用10%胎牛血清也是不行,。所以問問給位同仁,我的問題出現(xiàn)在哪里啊,,人家做ELISA,,很快就完成了,可我怎么那么做不出來呢,?
王同學(xué)可根據(jù)我司給出的建議:
1. 試劑盒沒有質(zhì)量問題,,應(yīng)該從樣品及保存上找原因。
2.你可以試試EDTA抗凝后取血漿檢測,。
3. 新鮮樣品檢測一下,,將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋后加入血清或血漿中檢測(也就是用血清進一步稀釋標(biāo)準(zhǔn)品),觀察檢測結(jié)果,,判斷是否是血淸中有未知物質(zhì)影響,。
4. 適當(dāng)延長顯色時間。
5. 更換酶標(biāo)儀,,排除儀器原因,。
6. 咨詢RD的,幫助找原因,。
7. 更換廠家試劑盒,,重新做,。
上海恒遠生物專業(yè)代理Elisa試劑盒,含稅含運費,,*進口試劑盒,,RD試劑盒,我司全面提供免費代測服務(wù),,用于試劑盒生產(chǎn)的抗體全部美國進口,。