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恒遠(yuǎn)分析血液DNA提取試劑盒說明書
閱讀:863 發(fā)布時(shí)間:2014-10-13血液DNA提取試劑盒特點(diǎn)
本產(chǎn)品是基于離心柱/硅膠膜原理的,、專門用于從新鮮或冷凍的動(dòng)物(包括人和禽類)抗凝全血中提取基因組DNA的試劑,。它具有下列特點(diǎn):
1.DNA純凈,OD260/280在1.8-2.0之間,。不含蛋白質(zhì)和RNA污染,,可直接用于PCR,、酶切、雜交等,。
2.產(chǎn)量高,,一般為1-10 ug/mL全血(對(duì)哺乳動(dòng)物血液)。
3.操作簡(jiǎn)單,,整個(gè)過程約20分鐘,,全室溫操作,適合大規(guī)模樣品處理,。
4.用量廣泛,, 每次可以處理少達(dá)20 uL(對(duì)禽類動(dòng)物血液), 多達(dá)1 mL的血液(對(duì)哺乳動(dòng)物血液),。
5.安全無毒,,本試劑盒對(duì)人體無毒,無腐蝕性和刺激性氣味,。
規(guī)格及成分
成 份 50次包裝
溶液A 25mL
溶液B 25 mL
離心吸附柱 50套
通用洗柱液 50mL
通用洗脫液 5 mL
使用手冊(cè) 1份
運(yùn)輸及保存
常溫運(yùn)輸,、4℃保存,有效期一年
血液DNA提取試劑盒使用方法
1.在0.02-1 mL新鮮或抗凝血液(冷凍血需先37℃水浴融化)中加入0.5 mL溶液A,,吹打混勻,。
a)哺乳動(dòng)物,血液使用量以300 uL以下為宜,,使用量越大產(chǎn)量越高,,但產(chǎn)率會(huì)降低。如果血液多于300 uL,,重復(fù)1-2步兩次可以提高產(chǎn)率,。
b)禽類動(dòng)物,血液使用量以20 uL以下為宜,,可以從第3步做起,。
2.室溫12,000-15,000 rpm離心2分鐘,沉淀呈粉紅色,,小心傾去上清,。
3.再短暫離心半分鐘,吸棄殘留的液體,。此步有利于后面的細(xì)胞裂解,,但一般可以省略。
4.向有沉淀的離心管內(nèi)加入0.5 mL溶液B(溶液B有少量晶體沉淀,,用前需要搖晃均勻),,用移液槍吹打使沉淀充分懸浮起來。此步目的是裂解細(xì)胞,,釋放DNA,,所以吹打越充分越好,。
5.靜置2分鐘待溶液變清亮后,將液體轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中并靜置2-5分鐘,,以使DNA與膜充分結(jié)合,。
6.12,000 rpm離心半分鐘,DNA將吸附到膜上,,棄收集管中的廢液,。
7.加入0.7 mL的通用洗柱液,12,000 rpm離心半分鐘,,棄收集管中的廢液,。
8.加入0.3 mL的通用洗柱液,12,000 rpm離心半分鐘,,棄收集管中的廢液,。
9.12,000 rpm離心半分鐘,甩干殘留液體,。此步很重要,,以去除膜上殘留通用洗柱液,否則會(huì)影響后續(xù)反應(yīng),。
10.將離心吸附柱置于一新的1.5 mL塑料離心管(自備)中,,加入適量50 uL通用洗脫液,室溫放置2分鐘,。如果將通用洗脫液在65℃預(yù)熱后再使用,,洗脫DNA的效果會(huì)更好。
11.12,000 rpm離心半分鐘,,離心管底溶液即DNA溶液,。可以立即使用或放冰箱長(zhǎng)期保存,。
上海恒遠(yuǎn)生物提供血液DNA提取試劑盒-柱式 Column Blood DNAout