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微載體培養(yǎng)的原理
閱讀:934 發(fā)布時間:2013-6-13微載體培養(yǎng)技術(micro-carrier culture technique)于1967年被用于動物細胞大規(guī)模培養(yǎng),。經過三十余年的發(fā)展,,該技術日趨完善和成熟,廣泛應用于生產疫苗,、基因工程產品等,。
微載體是指直徑60-250 μm,能適用于貼壁細胞生長的微珠,。一般是由天然葡聚糖或者各種合成的聚合物組成,。。它是用固體小珠作為細胞附著載體進行細胞培養(yǎng)的一種技術,。
微載體培養(yǎng)原理是將對細胞無害的微載體顆粒加入培養(yǎng)容器的培養(yǎng)液中,,作為載體,使細胞在微載體表面附著生長,,同時通過持續(xù)攪動使微載體始終保持懸浮狀態(tài),。 貼壁依賴性細胞在微載體表面上的增殖,要經歷黏附貼壁,、生長和擴增三個階段,。細胞只有貼附在固體基質表面才能增殖,因此細胞在微載體表面的貼附是進一步鋪展和生長的關鍵,。細胞主要通過靜電引力和范德華力與微載體黏附,,這取決于細胞與微載體的接觸概率和相融性。
由于動物細胞無細胞壁,,對剪切力敏感,,因此微載體培養(yǎng)在操作中對攪拌轉速及攪拌方式的要求都十分嚴格。微載體培養(yǎng)要求攪拌的速度非常慢,,zui大速度75 r/min,。細胞微載體培養(yǎng)通常分為三個時期:貼壁期,過渡期和培養(yǎng)期,。貼壁期和過渡期可以使用超低速細胞磁力攪拌系統進行培養(yǎng),,該系統具有超低的攪拌速度,剪切力小且能在低速下充分混勻細胞,。