公司動(dòng)態(tài)
“恒遠(yuǎn)公司”ELISA操作流程
閱讀:985 發(fā)布時(shí)間:2013-4-81. 根據(jù)需要,將若干孔德條帶放置在支架上,;
2. 將標(biāo)本,、陰性質(zhì)控、陽(yáng)性質(zhì)控以及標(biāo)準(zhǔn)品作 1:200 稀釋(將5μl樣品加稀 釋液稀釋到 1ml,,混勻) ,;
3. 取 100μl 已稀釋的血清樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和陰性質(zhì)控,、陽(yáng)性質(zhì)控加入相應(yīng)得孔板 內(nèi)(質(zhì)控和標(biāo)準(zhǔn)品至少需做兩孔) ,,A1 孔不加液體作為空白底色,;
4. 在 37℃溫箱中放置 30 分鐘;
5. 到時(shí)間后將孔被液體甩去,,并用 1X 洗滌液反復(fù)清洗 4 次,,zui后用蒸餾水洗 一次;
6. 在每孔內(nèi)加 100μl 酶結(jié)合物(需按比例稀釋?zhuān)?/span> A1 孔外) ,,輕微混勻,;
7. 在 37℃溫箱中放置 30 分鐘;
8. 甩去孔內(nèi)酶結(jié)合物,,用 1X 洗滌液反復(fù)清洗 4 次,zui后用蒸餾水洗一次,; (包括 A1 孔也加) ,,輕微
9. 在每孔內(nèi)加 100μlTMB(使用前混合A液和B液) 混勻;
10. 37℃放置 15 分鐘,; ,,輕微混勻;
11. 每孔加 50μl 1N 硫酸終止液(包括 A1 孔)
12. 在 15 分鐘內(nèi),,用酶標(biāo)儀在 450nm 處讀取吸光度值(OD 值) (將酶標(biāo)儀 A1 孔設(shè)定為空白孔) ,。
二、 ELISA試劑盒結(jié)果換算:
以標(biāo)準(zhǔn)樣品的 OD 值為軸,,標(biāo)準(zhǔn)樣品的數(shù)值為 X 軸,,在方格紙或計(jì)算機(jī)上作 出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),然后根據(jù)標(biāo)本的 OD 值讀數(shù)在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上讀出相應(yīng)的 IgG 抗體 濃度,。
三,、 ELISA試劑盒結(jié)果判定:
陰性:抗體濃度≤20u/ml 為正常 陽(yáng)性:抗體濃度>20u/ml 為陽(yáng)性
電 話(huà): /60449724
傳 真:
聯(lián) 系 人: 王
手 機(jī): ,,,