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小鼠胰島素試劑盒實驗規(guī)則：
       1、要保證移液槍的準確性,，誤差不能超過2%,。可用水和電子天平進行確定,。但有專業(yè)人員進行矯正,。
        2、要配備20ul,、50ul,、100ul、1000ul和排槍各一支,。吸取不同的液體后,，要更換槍頭。即使是吸取標準品時,。
        3,、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫,，以使結(jié)果更穩(wěn)定,。
        4、實驗時,，要使底物避光保存,。
        5、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確,。
        6,、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸,，減少誤差,。
        7、將液體加到酶標孔中時,，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去,。
        8,、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,，混勻液體,。也可以用酶標儀的晃動功能。
        9,、溫浴時,，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā),。
        10,、洗板時，每次洗液加入后,，應(yīng)靜置1分鐘,，使清洗更加*。沒有洗板機時,，倒去液體后,，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
        11,、洗液不夠時,，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液,，加入0.1%的吐溫20作為洗液,。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
        12,、底物是光敏感的,，要在臨用前現(xiàn)配。
        13,、檢測前,，要打開酶標儀,，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
        14,、底物有一定的毒性,，終止液對皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸,。
        15,、待檢樣品要澄清，否則會影響結(jié)果,。
        16,、溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
        17,、應(yīng)盡量做雙孔實驗,，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性。
        18,、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證,。
小鼠胰島素（INS）Elisa試劑盒操作步驟
1、準備：從冰箱取出試劑盒,，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2,、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液,。
3、加標準品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標包被板,，固定于框架上,，分別設(shè)置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,，記錄各孔位置,，在標準品孔中加入標準品50μ；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）,；空白對照孔不加。
4,、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min,。
5、洗板：棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。
6,、加酶標工作液：每孔加入酶標工作液50μL,，空白對照孔不加。
7,、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min,。
8、洗板：棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）,。
9,、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL,，平板混勻器混勻30s（或用手輕輕震蕩混勻30s）,，37℃避光顯色15min。
10,、終止：取出酶標板,，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)（顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11,、測定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi),，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）,。
12、計算：根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值,，計算出標準曲線的直線回歸方程,，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算,。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。