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上海恒遠(yuǎn):雞白介素2ELISA試劑盒放價(jià)熱賣中,!
閱讀:1088 發(fā)布時(shí)間:2012-7-17產(chǎn)品名稱:雞白介素2ELISA試劑盒
樣品形式:血清/血漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清/其它生物液體(具體情況請(qǐng)咨詢)
保存與運(yùn)輸:短期4℃/長(zhǎng)期-20℃保存
應(yīng)用范圍:科研用檢測(cè)試劑
檢測(cè)原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
保存:2-8℃
雞白介素2ELISA試劑盒 操作注意事項(xiàng)
● 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
● 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
● 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
● 使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
● 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
● 底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
● 加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
● 按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
安全性:
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B,,一旦接觸到這些液體,,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)難中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
試劑的準(zhǔn)備:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,,不能儲(chǔ)存,。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:
300 pg/ml | (6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul |
150 pg/ml | (5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
75 pg/ml | (4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
37.5 pg/ml | (3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
18.5 pg/ml | (2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
9.25 pg/ml | (1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
0 pg/ml | (空白對(duì)照) | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul |
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋,。
試劑盒性能:
1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品,。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng),。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%,。
雞白介素2ELISA試劑盒操作步驟:
1. 使用前,,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育45分鐘。
4. 甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘,。
6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作4次,。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
7. 每孔加入底物A,、B各50ul,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育5分鐘,。避免光照。
8. 取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9. 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
結(jié) 果 判 斷 與 分 析:
1、 儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2,、 以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),,相應(yīng)的IL-2標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,,樣品的IL-2含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,,計(jì)算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度,。
3,、 檢測(cè)值范圍: 0-300pg/ml
4、 敏感度:1.0pg/ml
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司專業(yè)代理美國(guó)R&D,、Amresco,、Sigma、Pharmacia,、Abcam等各*高質(zhì)量試劑盒和生物科研試劑,,產(chǎn)品涵蓋ELISA試劑盒、生物試劑,、抗體,、對(duì)照品、血清,、細(xì)胞,、培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)耗材等,,公司產(chǎn)品幾乎涉及所有領(lǐng)域,,代表了zui高品質(zhì)。
更多產(chǎn)品*請(qǐng)登錄http://www.gbdelisa.com/查詢,。業(yè)務(wù):,,60521817:王。
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