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影響抗原抗體反應(yīng)的因素
閱讀:2399 發(fā)布時間:2012-3-12影響抗原抗體反應(yīng)的因素
影響抗原抗體反應(yīng)的因素有兩方面,,一是反應(yīng)環(huán)境條件,,二是反應(yīng)物自身的因素,;,。
(一)反應(yīng)環(huán)境條件
1.電解質(zhì):抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合后,,雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體,若溶液中無電解質(zhì)參加,,仍不出現(xiàn)可見反應(yīng),。為了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液,。
2.酸堿度:抗原抗體反應(yīng)必須在合適的pH環(huán)境中進(jìn)行,。蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì),因此每種蛋白質(zhì)都有固定的等電點(diǎn),??乖贵w反應(yīng)一般在pH6~9進(jìn)行,有補(bǔ)體參與的反應(yīng)pH為7.2~7.4,,pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應(yīng),。
3.溫度:在一定范圍內(nèi),,溫度升高可加速分子運(yùn)動,抗原與抗體碰撞機(jī)會增多,,使反應(yīng)加速,。一般為15℃~40℃,常用的抗原抗體反應(yīng)溫度為37℃,,溫度如高于56℃,,可導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞,。每種試驗都有其*的zui適反應(yīng)溫度要求,。此外,適當(dāng)振蕩也可促進(jìn)抗原抗體分子的接觸,,加速反應(yīng),。
(二)反應(yīng)物自身的因素
1.抗體:不同來源的抗體,反應(yīng)性各有差異,,抗體的濃度,、特異性和親和力都影響抗體抗原反應(yīng),為提高試驗的可靠性,,應(yīng)選擇高特異性,、高親和力的抗體作診斷試劑。等價帶的寬窄也影響抗原抗體復(fù)合物的形成,,單克隆抗體不適用于沉淀反應(yīng),。
2.抗原:抗原的理化性狀、分子量,、抗原決定簇的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果,。顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng),可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應(yīng),,單價抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象,。
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