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                                                       ELISA試劑盒問(wèn)題解析
    設(shè)計(jì)ELISA復(fù)孔檢查時(shí)，是對(duì)同一個(gè)樣品作兩次稀釋,，再分別加到板上的兩個(gè)孔,，還是只稀釋一次，然后吸取兩次分別加到兩個(gè)孔,？前者似乎把稀釋時(shí)的誤差也考慮到了,，但做出來(lái)的結(jié)果兩個(gè)孔相關(guān)挺大的。而較常使用的是哪種稀釋方法,？
    為了減小誤差,，是先稀釋再加樣。而針對(duì)這位客戶所遇到的疑問(wèn),，我公司技術(shù)人員是這樣解說(shuō)的：
    1. 前者測(cè)的是稀釋和移液的誤差,，后者只有移液誤差。
    2. 一般都是稀釋一次,，分兩孔吧,。同濃度的分復(fù)孔。
    3. 由于是從同一原液稀釋,，一般不考慮稀釋誤差(稀釋誤差是存在的),，都是稀釋到想要的倍數(shù)直接分孔(而不是一一稀釋，這樣可以使稀釋誤差減小),。
    4. 復(fù)孔是為了排除移液體積,，板的影響，以及其他系統(tǒng)誤差的,，要求復(fù)孔的濃度是一致的,。稀釋后分孔能滿足此要求，一一稀釋不能,。

ELISA操作技巧
    1.操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,，如環(huán)境溫度（保持在18 C～25℃）,、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等,，要先查看水育箱溫度,，ELISA試劑盒是否符合要求。
    2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,，避免刮擦包被板底部,。加樣過(guò)程中避免液體外濺，血清殘留在反應(yīng)孔壁上,，加樣器吸頭要清洗干凈,，避免污染，加樣次序要與說(shuō)明書(shū)一致,，否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤,，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。
    3.手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,，洗滌次數(shù)不要超過(guò)說(shuō)明書(shū)推薦的洗滌次數(shù),，洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)滯留的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑L間竄流,，造成孔問(wèn)污染,，導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性。
    4.要保證加液量一致 我們?cè)谑褂脮r(shí)感覺(jué)滴瓶加液不如加樣器好,，滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn),，造成顯色不統(tǒng)一，判斷錯(cuò)誤,。
    5.顯色液量不可過(guò)多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下,，加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng)，顯色液量不能過(guò)多,，以免顯色過(guò)強(qiáng)。