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通常我們可用于ELISA檢測的樣本是有多種類型的,，如血清,、血漿、尿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等,，不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。正確的處理樣本是保證ELISA檢測的正確性和準(zhǔn)確性的*步,，下面簡單介紹一下細(xì)胞裂解液樣本及組織勻漿樣本的正確采集,、處理方法。

細(xì)胞裂解液

1) 吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,，用胰酶消化細(xì)胞,，加適量培養(yǎng)基將細(xì)胞從培養(yǎng)板上吹下來。懸浮細(xì)胞可省略,。

2) 收集細(xì)胞懸液,，1000×g離心10min，棄去培養(yǎng)基,，用預(yù)冷的PBS潤洗3次,。

3) 加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細(xì)胞。通常6孔板一個孔的細(xì)胞量需要150~250μL PBS重懸,。

4) 將樣品放入-20℃或-80℃,，使樣品冷凍，再放室溫解凍樣品,，反復(fù)凍融幾次,，使細(xì)胞充分裂解。也可將樣品進(jìn)行超聲破碎,，以達(dá)到裂解的目的,。

5) 4℃10000×g 離心10min，除去細(xì)胞碎片,，取上清,，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。

組織勻漿液

1) 將組織樣本用PBS (0.01M, PH 7.4) 沖洗,，洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì),。

2) 將組織塊稱重，記錄后剪碎,，碎塊應(yīng)盡量小,，便于勻漿得更充分。

3) 將組織按一定的比例加入預(yù)冷的PBS（臨用前加入蛋白酶抑制劑）勻漿,，勻漿時(shí)置于冰上或冰浴中,。（通常按組織重量：PBS體積=1:9的比例勻漿，例如1g的組織樣本對應(yīng)9mL的PBS,，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,，檢測后計(jì)算樣品濃度時(shí)應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)）。

4) 吸取勻漿液到離心管,，4℃5000×g 離心5~10min,，取上清,，-20℃或-80℃保存,，避免反復(fù)凍融。

注意：保證樣本不含NaN3,，因?yàn)?/SPAN>NaN3會抑制HRP的活性,，從而導(dǎo)致假陰性的結(jié)果。