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ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件有三點(diǎn)
閱讀:967 發(fā)布時(shí)間:2015-5-18的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件,。嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果,。
一,、樣本要求:可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清),、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本,。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固,、血塊收縮后即可取得,。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用,。
二、樣本收集方法:血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,,應(yīng)注意避免溶血,。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。一般說(shuō)來(lái),,在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,,超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存,。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,,分布不均,,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,,可上下顛倒混和,,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作,,也可加入適當(dāng)防腐劑,。
三、加樣:在ELISA中一般有3次加樣步聚,,即加標(biāo)本,,加酶結(jié)合物,加底物,。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,,不可產(chǎn)生氣泡,。