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廣東省中醫(yī)院咨詢:血清和血漿不同樣本ELISA結(jié)果是否不同
閱讀:1300 發(fā)布時(shí)間:2015-4-82014年11月28號(hào)廣東省中醫(yī)院林老師與我司取得,。向我司銷售專員咨詢人前列腺素E2(PGE2)等三個(gè)指標(biāo)的試劑盒價(jià)格,。規(guī)格、靈敏度等相關(guān)信息,,年底準(zhǔn)備做課題申報(bào),。年后老師反饋課題已申報(bào)下來著手收集臨床樣本開始實(shí)驗(yàn)。昨日下午林老師血漿樣本放置時(shí)間會(huì)不會(huì)對(duì)檢測(cè)指標(biāo)的結(jié)果有影響,。
我司吳詳細(xì)為老師做出解答:
可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份,。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物),。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本,。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清,。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得,。除特殊情況外,,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用,。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),,以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè),。如有細(xì)菌污染,,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng),。如在冰箱中保存過久,,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深,。一般說來,,在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過一周測(cè)定的需低溫冰存,。凍結(jié)血清融解后,,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾,,澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑,。