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Elisa咨詢:能否不用推薦的收集方法來收集血漿,?
閱讀:936 發(fā)布時(shí)間:2015-3-20客戶提問:Elisa實(shí)驗(yàn)中能否不用推薦的收集方法來收集血漿?
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司回答:
◆ 每一次按照推薦步驟操作的測(cè)定都是經(jīng)過驗(yàn)證可行的,。在某些測(cè)定中有些抗凝劑是不被推薦
的。具體請(qǐng)參看說明書,。
◆ 有些待檢測(cè)的分析物也存在于血小板中,,因此,推薦使用低血小板血漿,。
Elisa試劑盒正確的收集操作方法請(qǐng)參看說明書,。
可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,比如體液(如血清),、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清,、尿液),,有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本,。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,,其他成份均同等于血清。
制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固,、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外,,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本,。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,,應(yīng)注意避免溶血,,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色,。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè),。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng),。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,,在間接法ELISA中可使本底加深,。一般說來,在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,,超過一周測(cè)定的需低溫冰存,。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,,分布不均,,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,,可上下顛倒混和,,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾,,澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無菌操作,,也可加入適當(dāng)防腐劑,。
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