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技術(shù)文章

您知道四合一檢測(cè)試劑樣本一系列處理方法,?

閱讀:1766          發(fā)布時(shí)間:2014-11-25

上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)動(dòng)態(tài)解析:由我司技術(shù)人員經(jīng)過(guò)不斷實(shí)驗(yàn)和調(diào)試,,精心研發(fā)生產(chǎn)出的呋喃四類代謝物(呋喃西林,,呋喃妥因,呋喃它酮,,呋喃唑酮)四種免疫試劑盒的樣本:組 織(雞,、鴨肉/肝臟、魚,、蝦)蜂蜜等前處理四合一檢測(cè)試劑盒已經(jīng)成功上市,。靈敏度0.05PPB,檢測(cè)限0.1PPB,,回收率均能達(dá)到90%左右,,且都是在25度反應(yīng),,點(diǎn)板之前的所有操作步驟是一樣的,成為國(guó)內(nèi)研制出真正意義上的“四合一”的廠家,。此項(xiàng)改進(jìn),,將大大縮短實(shí)驗(yàn)員的的工作時(shí)間。那么您知道四合一檢測(cè)試劑樣本一系列處理方法,?跟隨上海恒遠(yuǎn)生物一起了解下呋喃四類代謝物免疫試劑的溶液的配制

樣本前處理需配制:

配液1:0.1M  K2HPO4 溶液

稱22.8g K2HPO4·3H2O加去離子水溶解定溶至1L

配液2:1M  HCL  

8.6mL濃HCL加去離子水定容至100mL

配液3:1M  NaOH溶液

        稱取4g NaOH,,加去離子水定容至100ml。

配液4:復(fù)溶液1×

2×復(fù)溶液在使用前請(qǐng)按1:1稀釋(1份濃縮復(fù)溶液+1份去離子水)

配液5:洗滌液

將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水稀釋

20×濃縮洗滌液在使用前請(qǐng)按1:19稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水)(可按需配置)

呋喃四類代謝物樣本前處理方法

樣本處理前須知

    處理任何樣本時(shí),,都須注意:

(1)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。

   (2)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,,必須使用潔凈實(shí)驗(yàn)器具,,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

呋喃四類代謝物樣本處理步驟:

(A)組 織,、蜂蜜(雞,、鴨肉/肝臟、魚,、蝦,、等)

1、稱取1±0.05g均質(zhì)樣于離心管中,;

2,、加入4ml去離子水,0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑充分振蕩,;

3,、在37℃過(guò)一夜孵育(約16小時(shí))或56℃水浴孵育2小時(shí);

4,、分別加入5ml 0.1M K2HPO4 溶液,,0.4ml 1M NaOH溶液和5ml的乙酸乙酯,振蕩5分鐘,;

5,、室溫下4000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,; 

6,、取出2.5ml的上層液到另一個(gè)離心管中,50℃水浴氮?dú)獯蹈桑?/p>

7,、 用1ml正已烷溶解殘留物,,加入1ml復(fù)溶工作液充分振蕩混合30秒;室溫4000轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘,;

8,、 取50μl下層用于分析。

(樣本稀釋倍數(shù)為2)


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