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葉綠素上市以來,，由于試劑的穩(wěn)定性,，特異性一直是我司銷售的試劑，上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司代理葉綠素多年,，產(chǎn)品質(zhì)量及服務(wù)一直深受老師同學(xué)們的厚愛,。
葉綠素是一種二羧酸—葉綠酸與甲醇和葉綠醇形成的復(fù)雜酯，故可與堿起皂化反應(yīng)而生成醇（甲醇和葉綠醇）和葉綠酸的鹽,，產(chǎn)生的鹽能溶于水中,，可用此法將葉綠素與類胡蘿卜素分開；葉綠素與類胡蘿卜素都具有光學(xué)活性,，表現(xiàn)出一定的吸收光譜,，可用分光鏡檢查或用分光光度計測定；葉綠素吸收光量子而轉(zhuǎn)變成激發(fā)態(tài),，激發(fā)態(tài)的葉綠素分子很不穩(wěn)定,，當(dāng)它變回到基態(tài)時可發(fā)射出紅光量子，因而產(chǎn)生熒光,。葉綠素的化學(xué)性質(zhì)很不穩(wěn)定,，容易受強光的破壞,，特別是當(dāng)葉綠素與蛋白質(zhì)分離以后，破壞更快,，而類胡蘿卜素則較穩(wěn)定,。葉綠素中的鎂可以被H 所取代而成褐色的去鎂葉綠素，后者遇銅則成為綠色的銅代葉綠素,，銅代葉綠素很穩(wěn)定,，在光下不易破壞，故常用此法制作綠色多汁植物的浸漬標(biāo)本,。

實驗步驟
1. 光對葉綠素的破壞作用
   1）取4支小試管,，其中兩支各加入5ml用水研磨的葉片勻漿。另外兩支各加入2.5ml葉綠體色素乙醇提取液,，并用95%乙醇稀釋1倍,。
   2）取1支裝有葉綠素乙醇提取液的試管和1支裝有水研磨葉片均漿的試管，放在直射光下,，另外兩支放到暗處,，40min后對比觀察顏色有何變化，解釋其原因,。
2. 熒光現(xiàn)象的觀察
取1支20ml刻度試管加入5ml濃的葉綠體色素乙醇提取液,，在直射光下觀察溶液的透射光與反射光顏色有何不同。
3. 皂化作用（綠色素與黃色素的分離）
   1）在做過熒光現(xiàn)象觀察的葉綠體色素乙醇提取液試管中加入1.5ml 20%KOH-甲醇溶液,，充分搖勻,。
   2）片刻后，加入5ml苯,，搖勻,，再沿試管壁慢慢加入1～1.5ml蒸餾水，輕輕混勻（勿激烈搖蕩）,，于試管架上靜置分層,。若溶液不分層，則用滴管吸取蒸餾水,，沿管壁滴加,，邊滴加邊搖動，直到溶液開始分層時,，靜置,。可以看到溶液逐漸分為兩層,，下層是稀的乙醇溶液,，其中溶有皂化的葉綠素a和b（以及少量的葉黃素）；上層是苯溶液,，其中溶有黃色的胡蘿卜素和葉黃素,。
4. 吸收光譜的觀察  將上述已分層的試管溶液,，用分光鏡觀察兩類色素的吸收光譜，首先讓下層綠色素部分對準(zhǔn)進光孔,，看光譜有何變化,；然后再將上層黃色素溶液對準(zhǔn)進光孔，看光譜又有何變化,。把觀察的結(jié)果用簡單的圖表示出來,。
5. H 和Cu2 對葉綠素分子中Mg2 的取代作用
方法一：
   1）取兩支試管，*支試管加葉綠體色素提取液2ml,，作為對照,。第二支試管中加葉綠體色素提取液5ml，再加入5%HCl數(shù)滴,，搖勻,，觀察溶液顏色變化,。
   2）當(dāng)溶液變褐后,，再加入少量醋酸銅粉末，微微加熱,，觀察記載溶液顏色變化情況,，并與對照試管相比較。
方法二：
另取醋酸－醋酸銅溶液20ml,，以燒杯盛之,。取新鮮植物葉片兩片，放入燒杯中,，用酒精燈慢慢加熱,，隨時觀察并記錄葉片顏色的變化，直至顏色不再變化為止,。解釋原因,。
注意事項
1．在低溫下發(fā)生皂化反應(yīng)的葉綠體色素溶液，易乳化而出現(xiàn)白絮狀物,，溶液渾濁,，且不分層?？杉ち覔u勻,，放在30～40℃的水浴中加熱，溶液很快分層,，絮狀物消失,，溶液變得清澈透明。
2．分離色素用的圓形濾紙,，在中心打的小圓孔,，周圍必須整齊,，否則分離的色素不是一個同心圓。