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葉綠素上市以來(lái),，由于試劑的穩(wěn)定性,，特異性一直是我司銷售的試劑,，上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司代理葉綠素多年，產(chǎn)品質(zhì)量及服務(wù)一直深受老師同學(xué)們的厚愛(ài),。
葉綠素是一種二羧酸—葉綠酸與甲醇和葉綠醇形成的復(fù)雜酯,，故可與堿起皂化反應(yīng)而生成醇（甲醇和葉綠醇）和葉綠酸的鹽，產(chǎn)生的鹽能溶于水中,，可用此法將葉綠素與類胡蘿卜素分開(kāi),；葉綠素與類胡蘿卜素都具有光學(xué)活性，表現(xiàn)出一定的吸收光譜,，可用分光鏡檢查或用分光光度計(jì)測(cè)定,；葉綠素吸收光量子而轉(zhuǎn)變成激發(fā)態(tài)，激發(fā)態(tài)的葉綠素分子很不穩(wěn)定,，當(dāng)它變回到基態(tài)時(shí)可發(fā)射出紅光量子,，因而產(chǎn)生熒光。葉綠素的化學(xué)性質(zhì)很不穩(wěn)定,，容易受強(qiáng)光的破壞,，特別是當(dāng)葉綠素與蛋白質(zhì)分離以后,，破壞更快，而類胡蘿卜素則較穩(wěn)定,。葉綠素中的鎂可以被H 所取代而成褐色的去鎂葉綠素,，后者遇銅則成為綠色的銅代葉綠素，銅代葉綠素很穩(wěn)定,，在光下不易破壞,，故常用此法制作綠色多汁植物的浸漬標(biāo)本。

實(shí)驗(yàn)步驟
1. 光對(duì)葉綠素的破壞作用
   1）取4支小試管,，其中兩支各加入5ml用水研磨的葉片勻漿,。另外兩支各加入2.5ml葉綠體色素乙醇提取液，并用95%乙醇稀釋1倍,。
   2）取1支裝有葉綠素乙醇提取液的試管和1支裝有水研磨葉片均漿的試管,，放在直射光下，另外兩支放到暗處,，40min后對(duì)比觀察顏色有何變化,，解釋其原因。
2. 熒光現(xiàn)象的觀察
取1支20ml刻度試管加入5ml濃的葉綠體色素乙醇提取液,，在直射光下觀察溶液的透射光與反射光顏色有何不同,。
3. 皂化作用（綠色素與黃色素的分離）
   1）在做過(guò)熒光現(xiàn)象觀察的葉綠體色素乙醇提取液試管中加入1.5ml 20%KOH-甲醇溶液，充分搖勻,。
   2）片刻后,，加入5ml苯，搖勻,，再沿試管壁慢慢加入1～1.5ml蒸餾水,，輕輕混勻（勿激烈搖蕩），于試管架上靜置分層,。若溶液不分層,，則用滴管吸取蒸餾水，沿管壁滴加,，邊滴加邊搖動(dòng),，直到溶液開(kāi)始分層時(shí)，靜置,?？梢钥吹饺芤褐饾u分為兩層，下層是稀的乙醇溶液,，其中溶有皂化的葉綠素a和b（以及少量的葉黃素）,；上層是苯溶液，其中溶有黃色的胡蘿卜素和葉黃素。
4. 吸收光譜的觀察  將上述已分層的試管溶液,，用分光鏡觀察兩類色素的吸收光譜,，首先讓下層綠色素部分對(duì)準(zhǔn)進(jìn)光孔，看光譜有何變化,；然后再將上層黃色素溶液對(duì)準(zhǔn)進(jìn)光孔,，看光譜又有何變化。把觀察的結(jié)果用簡(jiǎn)單的圖表示出來(lái),。
5. H 和Cu2 對(duì)葉綠素分子中Mg2 的取代作用
方法一：
   1）取兩支試管,，*支試管加葉綠體色素提取液2ml，作為對(duì)照,。第二支試管中加葉綠體色素提取液5ml,，再加入5%HCl數(shù)滴，搖勻,，觀察溶液顏色變化,。
   2）當(dāng)溶液變褐后，再加入少量醋酸銅粉末,，微微加熱,，觀察記載溶液顏色變化情況，并與對(duì)照試管相比較,。
方法二：
另取醋酸－醋酸銅溶液20ml,，以燒杯盛之。取新鮮植物葉片兩片,，放入燒杯中,，用酒精燈慢慢加熱，隨時(shí)觀察并記錄葉片顏色的變化,，直至顏色不再變化為止,。解釋原因。
注意事項(xiàng)
1．在低溫下發(fā)生皂化反應(yīng)的葉綠體色素溶液,，易乳化而出現(xiàn)白絮狀物,，溶液渾濁,，且不分層,。可激烈搖勻,，放在30～40℃的水浴中加熱,，溶液很快分層，絮狀物消失,，溶液變得清澈透明,。
2．分離色素用的圓形濾紙，在中心打的小圓孔，周圍必須整齊,，否則分離的色素不是一個(gè)同心圓,。