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人可溶性腫瘤壞死因子酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
閱讀：1421 發(fā)布時間：2013-3-21ＲＤ“人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體試劑盒 "質(zhì)量保證,，公司主要供應人,、小鼠、大鼠,、豚鼠,、兔子、犬,、雞,、馬、猴,、羊,、豬、牛等各類植物動物ELISA試劑盒,更多信息歡迎您,。
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人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體試劑盒規(guī)格：96人份/48人份
英文名稱：Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,sTRAIL ELISA KIT
保存條件：2-8℃
檢測方法：酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）
經(jīng)營種類：進口分裝和原裝
主要作用：科研
產(chǎn)品用途：For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免費代測服務(wù).,。
預期應用：ELISA法定量測定血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體試劑盒含量,。
實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠皮質(zhì)酮（CORT）水平,。用純化的大鼠皮質(zhì)酮（CORT）抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入皮質(zhì)酮（CORT）,，再與HRP標記的羊抗鼠抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的大鼠皮質(zhì)酮（CORT）呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠皮質(zhì)酮（CORT）濃度,。
試劑盒組成
| 1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶標試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標準品（160pg/ml） | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
| 4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
| 5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
| 6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
| 80pg/ml | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 40pg/ml | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 20pg/ml | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 10pg/ml | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 5pg/ml | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復5次，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11. 測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。
計算
以標準物的濃度為橫坐標,，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線,，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度,。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果,。
3．各步加樣均應使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣,。
4． 請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：,；2-8℃,。
2．有效期：6個月
公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾,、積極溝通,、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù)，力求為我國科研事業(yè)添磚加瓦,。