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恒遠生物|小鼠T淋巴細胞 CTLL-2 培養(yǎng)攻略
閱讀：185 發(fā)布時間：2025-3-12一,、細胞基本信息
品牌名稱: 恒遠生物
產(chǎn)品貨號: HYCC20033
細胞名稱：CTLL-2
中文名稱：小鼠T淋巴細胞
種屬來源：小鼠
組織來源：T細胞
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
生長特性：懸浮生長
二,、培養(yǎng)條件
氣相：95%空氣，5%二氧化碳
溫度：37℃
三,、培養(yǎng)基與添加物
基礎(chǔ)培養(yǎng)基：RPMI-1640
添加物：10%特級胎牛血清（FBS）,、100U/ml（或100IU/ml）IL-2、1%青霉素/鏈霉素（P/S）
注意,，有些培養(yǎng)體系可能略有不同,，但核心成分通常包括RPMI-1640、FBS和IL-2,。
四,、細胞培養(yǎng)步驟
1. 細胞復(fù)蘇
從液氮罐或-80℃冰箱中取出凍存管，迅速放入37℃水浴中搖晃解凍,。
將解凍后的細胞懸液移至含5ml培養(yǎng)基的離心管中,，1000rpm離心5min。
棄去上清液,，補加5mL培養(yǎng)基后吹勻,，接種于T25培養(yǎng)瓶中（或6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜。
第二天換液并檢查細胞密度,。
2. 細胞傳代
當(dāng)細胞密度達到80%-90%時，進行傳代培養(yǎng),。
離心收集細胞（1000rpm,，5-8min），棄去上清液,。
補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6mL培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中或6cm培養(yǎng)皿中。
對于較難培養(yǎng)的細胞或新手,，可采用豎瓶培養(yǎng)法,，逐步補加培養(yǎng)基，待細胞密度升高后再進行傳代,。
3. 細胞凍存
選擇生長狀態(tài)良好的細胞進行凍存,。
離心收集細胞（1000rpm，5-8min）,，去除上清液,。
按凍存數(shù)量加入無血清細胞凍存液，輕輕混勻后,，分裝入凍存管中（每管約1mL細胞懸液）,。
將凍存管放入-80℃冰箱中過夜，然后轉(zhuǎn)入液氮罐中儲存,。
五,、培養(yǎng)注意事項
細胞接收與檢查：收到細胞后，首先檢查細胞瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有異常,，請及時與我司（恒遠生物）聯(lián)系,。
無菌操作：在細胞培養(yǎng)過程中，應(yīng)嚴格遵守?zé)o菌操作規(guī)程,，避免細胞污染,。
細胞密度監(jiān)控：定期觀察細胞生長情況，及時傳代以避免細胞密度過高導(dǎo)致死亡,。
培養(yǎng)基更換：根據(jù)細胞生長情況和培養(yǎng)基顏色變化,，適時更換新鮮培養(yǎng)基。
六,、售后服務(wù)與細胞保存
若細胞在運輸或培養(yǎng)過程中出現(xiàn)問題,，應(yīng)及時與我司聯(lián)系并提供相關(guān)證據(jù)（如細胞照片,、操作記錄等），以便進行售后處理,。細胞應(yīng)儲存在液氮罐中,，避免反復(fù)凍融以確保細胞活性。
上海恒遠生物科技有限公司擁有自己的實驗室,，備有專業(yè)的技術(shù)研發(fā)團隊,，長期致力于各種生物試劑，細胞,，血清,，ELISA試劑盒的研發(fā)與銷售，實驗提供免費代測服務(wù),，并提供技術(shù)服務(wù),，如果您有實驗上的問題歡迎前來咨詢，為您提供專業(yè)的一對一技術(shù)指導(dǎo),。