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細(xì)胞鋪板怎樣才能鋪得均勻?
閱讀：451 發(fā)布時(shí)間：2025-3-5做 cell biology 實(shí)驗(yàn),，細(xì)胞鋪板大概是很常見(jiàn)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)了。但是有很多人不是很得要領(lǐng),，鋪得不是均勻： 要么中間密周圍稀,，要么周圍密中間禿頂。在這里分享一些一些技巧：
1,、一般96孔板每孔是加100微升細(xì)胞懸液,，從孔的左邊靠近底部加入，加完半邊板后,，將未加的細(xì)胞懸液混一下再,，繼續(xù)加剩余的半邊板子，都加完后蓋上蓋子,，左手輕輕扶住板的左邊,，右手輕輕敲擊板的右邊緣,，注意把握力度（一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不好）,，依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘,，放入37度培養(yǎng)箱,。
2、細(xì)胞懸液加完后,，將細(xì)胞培養(yǎng)板抬高,，對(duì)著燈光，從底部往上看,，看細(xì)胞有沒(méi)有抱團(tuán),。然后從底部敲擊，使之分散,。
3,、如果實(shí)驗(yàn)室有平板振蕩器的話，建議用這個(gè)儀器稍振蕩一下,，效果不錯(cuò)，就是振幅小,，頻率高的那種,。
4、細(xì)胞要盡量打散,，大部分呈單個(gè)狀態(tài),。離心后，要充分懸??！還有轉(zhuǎn)移到六孔板后，是要晃得,！晃的時(shí)候不要讓那個(gè)細(xì)胞液轉(zhuǎn)圈,，不然細(xì)胞就全被帶到中間去了，就會(huì)不均勻,！
5,、一瓶細(xì)胞長(zhǎng)滿后，正常處理,，在培養(yǎng)瓶里吹勻,，然后鋪6孔板，每孔2毫升,，鋪完之后不用觀察直接用酒精棉擦拭,，然后放到培養(yǎng)箱里,，輕微的左三圈 右三圈 前三圈 后三圈?；旧?4小時(shí)之后觀察 每孔的細(xì)胞都會(huì)很均勻,。
6、計(jì)算好所需要的全部液體量和細(xì)胞量,，混勻后,，加到六孔板里，六孔板按橫8字型晃,，顯微鏡下觀察,，如果不均勻，按上述方法再晃,。如果細(xì)胞未計(jì)數(shù)直接種的話,，在種六孔板的過(guò)程中，隨時(shí)晃一下混勻用的瓶子,，瓶子我通常是順時(shí)針或逆時(shí)針轉(zhuǎn)圈,。
7、放在水平板面上先上下移動(dòng),，再左右移動(dòng),，每個(gè)方向５到６次，但關(guān)鍵的是搖完后直接放入培養(yǎng)箱中,，不要再做過(guò)多的運(yùn)動(dòng),，例如放到鏡下去看，否則很容易就又聚到中間去了,。
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