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細(xì)胞鋪板怎樣才能鋪得均勻?
閱讀：285 發(fā)布時間：2025-3-5做 cell biology 實驗，細(xì)胞鋪板大概是很常見的一個實驗了。但是有很多人不是很得要領(lǐng),，鋪得不是均勻： 要么中間密周圍稀,，要么周圍密中間禿頂。在這里分享一些一些技巧：
1,、一般96孔板每孔是加100微升細(xì)胞懸液,，從孔的左邊靠近底部加入，加完半邊板后,，將未加的細(xì)胞懸液混一下再,，繼續(xù)加剩余的半邊板子，都加完后蓋上蓋子,，左手輕輕扶住板的左邊,，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（一般輕巧敲三下）,，太強(qiáng)或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊,，靜置約5分鐘,，放入37度培養(yǎng)箱。
2,、細(xì)胞懸液加完后,，將細(xì)胞培養(yǎng)板抬高，對著燈光,，從底部往上看,，看細(xì)胞有沒有抱團(tuán)。然后從底部敲擊,，使之分散,。
3、如果實驗室有平板振蕩器的話,，建議用這個儀器稍振蕩一下,，效果不錯，就是振幅小,，頻率高的那種,。
4、細(xì)胞要盡量打散,，大部分呈單個狀態(tài),。離心后，要充分懸??！還有轉(zhuǎn)移到六孔板后,，是要晃得！晃的時候不要讓那個細(xì)胞液轉(zhuǎn)圈,，不然細(xì)胞就全被帶到中間去了,，就會不均勻！
5,、一瓶細(xì)胞長滿后,，正常處理，在培養(yǎng)瓶里吹勻,，然后鋪6孔板,，每孔2毫升，鋪完之后不用觀察直接用酒精棉擦拭,，然后放到培養(yǎng)箱里,，輕微的左三圈 右三圈 前三圈 后三圈?；旧?4小時之后觀察 每孔的細(xì)胞都會很均勻,。
6、計算好所需要的全部液體量和細(xì)胞量,，混勻后,，加到六孔板里，六孔板按橫8字型晃,，顯微鏡下觀察,，如果不均勻，按上述方法再晃,。如果細(xì)胞未計數(shù)直接種的話,，在種六孔板的過程中，隨時晃一下混勻用的瓶子,，瓶子我通常是順時針或逆時針轉(zhuǎn)圈,。
7、放在水平板面上先上下移動,，再左右移動,，每個方向５到６次，但關(guān)鍵的是搖完后直接放入培養(yǎng)箱中,，不要再做過多的運動,，例如放到鏡下去看，否則很容易就又聚到中間去了,。
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