化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
PCR技術(shù)的操作原理,？
閱讀：200 發(fā)布時(shí)間：2025-1-8基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。
PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：
①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)間后,，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,，使之成為單鏈,，以便它與引物結(jié)合,，為下輪反應(yīng)做準(zhǔn)備,；
②模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合,；
③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的作用下,，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板,，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理,，合成一條新的與模板DNA 鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈。
重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過(guò)程,，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈",，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘,， 2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍。
更多實(shí)驗(yàn)資訊可咨詢我司業(yè)務(wù)員,。我司提供實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù),，為廣大科研工作者大大節(jié)省了重復(fù)勞動(dòng)的時(shí)間和精力,，我們有過(guò)硬的技術(shù)咨詢和完善的售后服務(wù),，購(gòu)買ELISA試劑盒贈(zèng)送免費(fèi)代測(cè)服務(wù),，在線一對(duì)一技術(shù)指導(dǎo),，為您解決后顧之憂。