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酶聯(lián)免疫實驗易錯問題解答
閱讀:325 發(fā)布時間:2024-12-16在操作酶聯(lián)免疫試劑盒實驗時,有很多技術(shù)問題是比較常見且易錯的,,而就是這些問題困惑不少實驗操作員,。恒遠生物根據(jù)技術(shù)部的問題處理總結(jié),整理出了幾個比較常見的問題,,跟著小編一起往下看吧:
一,、為什么必須設置復孔?
為獲得更準確的實驗結(jié)果,,強烈建議標準品及樣本進行復孔檢測,,因為復孔檢測可以:計算平均值,確保實驗結(jié)果更準確,;解決實驗中誤操作造成的跳孔現(xiàn)象,;計算CV值,對實驗的操作和試劑盒的精密度進行評估,。
二,、重復性差怎么辦?
1.樣品數(shù)量不一,,加樣時間長短不一,。
2.酶標儀濾光片不對或輸入波長不對。
3.酶標儀測定重復性差,。
三,、為什么標準曲線線性較差,?
需要按照推薦方式保存標準品;溶解標準品之前需短暫離心,,收集粉末,;確保標準品溶解和混勻,然后再進行后續(xù)的系列稀釋步驟,,確保每一步都充分混勻且移液,;顯色的恰當終止;選擇合適的數(shù)學擬合方程繪制標準曲線,。
四,、為什么所有試劑和檢測樣本要平衡至室溫后再進行加樣操作?
溫度是ELISA結(jié)合反應的重要影響因素,。為了使所有樣本在一致的溫度下反應,,實驗前務必將所有試劑平衡至室溫,包括檢測樣本,。避免因溫度的動力學反應差異而導致ELISA檢測結(jié)果的不準確,。
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