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胎牛血清培養(yǎng)如何防止黑點生成
閱讀:303 發(fā)布時間:2024-10-28近期有客戶向我們咨詢胎牛血清細胞培養(yǎng)中黑點如何防止生成,?對此我司技術(shù)專員給出了詳細了解釋,,為防止客戶由于操作方面而使黑點生成的辦法,。因此定要做好以下幾點,。方可使細胞培養(yǎng)順利,。
1.盡可能地減少血清凍融次數(shù),。
2.培養(yǎng)基無需37℃水浴,。
3.培養(yǎng)基保持zuiPH 值7.0-7.2。
4.嚴格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),,容器定期刷洗,。
5.掌握細胞傳代的zui時機,細胞切勿生長過老,。
一,、化凍
將血清從-20 度冰箱中取出,室溫(或浸于自來水中)化凍(約需要30分鐘至2小時,,也可放于4度冰箱化凍過夜,;化凍后若不馬上滅活,可以放入4度冰箱中暫時保存)
二,、滅活
1.放入室溫的水浴鍋內(nèi)開始加熱(同時放入一個空的血清瓶,,內(nèi)裝100ml自來水,插入一根溫度計,,溫度監(jiān)控以此為準)
2.當溫度計顯示56度時,,停止加熱,改為間斷加熱,,維持56度(±0.5度)30分鐘(±3分鐘,;若不小心使溫度上升超過56度,則:若仍未超過60度,,且時間很短,,比如不超過5分鐘,則仍可使用,;若超過60度,,或者時間較長,則棄去不用,,或者嘗試用于一些普通細胞的培養(yǎng))
3.取出,,自然冷卻至室溫(約需1-3小時),可分裝或-20度繼續(xù)凍存,。
三,、分裝
1.轉(zhuǎn)入無菌間,在超凈臺內(nèi)將血清分裝入10ml離心管中(注意預(yù)先要將血清輕輕搖動數(shù)周,、混勻,;用吸液管或吹大管吹出血清時要注意:不要吹出氣泡(血清很粘稠,很容易產(chǎn)生氣泡,;如果產(chǎn)生氣泡,, 則在酒精燈火焰上過一下)。
2.放入-20 度冰箱凍存,。
3.全部操作約需要4-6小時,。
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