化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
ELISA試劑盒靈敏度低?
閱讀：794 發(fā)布時間：2024-9-26近日,，有客戶在做完實驗后,，反映陽性對照、質(zhì)控在內(nèi)的所有板孔顏色均較淡,。這是什么原因造成的,？我司技術(shù)整理后給出如下解析，邀您來看看,！
容易造成的原因有：
1.試劑盒必須在有效期內(nèi)使用,， 超過有效期的產(chǎn)品可能會產(chǎn)生很弱的信號；
2.試劑盒沒有按規(guī)定進行保存,，受高溫影響,；
3.試劑、樣品用前未平衡至室溫,；
4.加入試劑的體積和時間有誤,，移液器計量不準，吸嘴內(nèi)水分太多或不清潔,；
5.洗板及加樣過程中,，酶標受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力；
6.孵育時間及孵育溫度未達到要求 ,，反應(yīng)板放入培養(yǎng)箱時注意溫度并及時調(diào)整,；
7.洗板次數(shù)過多，或濃縮洗液稀釋倍數(shù)不符合要求；洗滌沖擊力太大,。浸泡時間太長,；
8.顯色劑加量不足或順序顛倒，或混合后加入,；
9.底物作用時間不夠,；
10.蒸餾水水質(zhì)有問題。
解決辦法：
1.實驗前檢查試劑的組分及批號,，確認試劑未過期,。
2.不要將試劑盒長時間置于常溫下，按使用規(guī)定儲藏,。
3.確定所使用的試劑體積正確，加入時間適當,。
4.校正移液器,，移液器與吸嘴配合要緊密吻合。移液不宜太快,，排放應(yīng)干凈,。
5.確認盛酶標的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等，確認配制洗液的容器已洗干凈,，確認配制洗液的純化水達到要求且未受污染,。
6.孵育溫度應(yīng)控制在 37-38℃，孵育時間嚴格按照說明書操作,。保溫期內(nèi)不宜多開門,，以免影響保溫。
7.嚴格按說明書要求稀釋濃縮洗液及洗板,，減小洗滌沖擊力,，按說明書要求置留洗滌液時間和洗滌次數(shù)。
8.顯色劑滴瓶垂直向下,，持力均勻,，滴速不宜過快，先加顯色劑 A,，后加顯色劑B,，不可將A、B液混合后加入
9.準確定時,。
10.測定蒸餾水配制試劑對酶免疫法的影響,。
上海恒遠生物專業(yè)提供生命科學領(lǐng)域的技術(shù)服務(wù)，提供實驗技術(shù)服務(wù),，為廣大科研工作者大大節(jié)省了重復(fù)勞動的時間和精力,，我們有過硬的技術(shù)咨詢和完善的售后服務(wù)，購買ELISA試劑盒贈送免費代測服務(wù)，在線一對一技術(shù)指導(dǎo),，為您解決后顧之憂,。