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ELISA試劑盒靈敏度低?
閱讀：986 發(fā)布時間：2024-9-26近日，有客戶在做完實驗后,，反映陽性對照,、質控在內的所有板孔顏色均較淡。這是什么原因造成的,？我司技術整理后給出如下解析,，邀您來看看！
容易造成的原因有：
1.試劑盒必須在有效期內使用,， 超過有效期的產品可能會產生很弱的信號,；
2.試劑盒沒有按規(guī)定進行保存，受高溫影響,；
3.試劑,、樣品用前未平衡至室溫；
4.加入試劑的體積和時間有誤,，移液器計量不準,，吸嘴內水分太多或不清潔,；
5.洗板及加樣過程中,，酶標受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力；
6.孵育時間及孵育溫度未達到要求 ,，反應板放入培養(yǎng)箱時注意溫度并及時調整,；
7.洗板次數過多，或濃縮洗液稀釋倍數不符合要求,；洗滌沖擊力太大,。浸泡時間太長；
8.顯色劑加量不足或順序顛倒,，或混合后加入,；
9.底物作用時間不夠；
10.蒸餾水水質有問題。
解決辦法：
1.實驗前檢查試劑的組分及批號,，確認試劑未過期,。
2.不要將試劑盒長時間置于常溫下，按使用規(guī)定儲藏,。
3.確定所使用的試劑體積正確,，加入時間適當。
4.校正移液器,，移液器與吸嘴配合要緊密吻合,。移液不宜太快，排放應干凈,。
5.確認盛酶標的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,，確認配制洗液的容器已洗干凈，確認配制洗液的純化水達到要求且未受污染,。
6.孵育溫度應控制在 37-38℃,，孵育時間嚴格按照說明書操作。保溫期內不宜多開門,，以免影響保溫,。
7.嚴格按說明書要求稀釋濃縮洗液及洗板，減小洗滌沖擊力,，按說明書要求置留洗滌液時間和洗滌次數,。
8.顯色劑滴瓶垂直向下，持力均勻,，滴速不宜過快,，先加顯色劑 A，后加顯色劑B,，不可將A,、B液混合后加入
9.準確定時。
10.測定蒸餾水配制試劑對酶免疫法的影響,。
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